CONTEXTUALIZACAO: A asssistencia ventiloria mecânica (AVM) prolongada associada a altas fracoes de oxigenio produz impacto negativo na funcao diafragmatica. No entanto, nao sao claros os efeitos agudos da AVM associada a altas fracoes de oxigenio em pulmoes aparentemente sadios. OBJETIVO: Analisar os efeitos agudos da ventilacao mecânica com hiperoxia na morfometria do diafragma de ratos. Metodos: Estudo experimental prospectivo, com nove ratos Wistar, com peso de 400±20 g, randomizados em dois grupos: controle (n=4), anestesiados, traqueostomizados e mantidos em respiracao espontânea em ar ambiente por 90 minutos e experimental (n=5), tambem anestesiados, curarizados, traqueostomizados e mantidos em ventilacao mecânica controlada pelo mesmo tempo. Foram submetidos a toracotomia mediana para coleta da amostra das fibras costais do diafragma que foram seccionadas a cada 5 μm e coradas pela hematoxilina e eosina para o estudo morfometrico. Para a analise estatistica, foi utilizado o teste t de Student nao pareado, com nivel de significância de p<0,05. RESULTADOS: Nao foram encontrados sinais indicativos de lesao muscular aguda, porem observou-se dilatacao dos capilares sanguineos no grupo experimental. Os dados morfometricos do diâmetro transverso maximo da fibra muscular costal foram em media de 61,78±17,79 µm e de 70,75±9,93 µm (p=0,045) nos grupos controle e experimental respectivamente. CONCLUSAO: A ventilacao mecânica de curta duracao com elevada concentracao de O2 produziu marcantes alteracoes microvasculares e musculares, podendo refletir o inicio do processo inflamatorio.