Abstract
目的 观察转化生长因子-β2(TGF-β2)特异性短发夹RNA(shRNA)对人眼Tenon囊成纤维细胞(TCFs)TGF-β2表达的影响及对人TCFs增生的抑制作用.方法 根据小干扰RNA(siRNA)的设计原则,针对TGF-β2基因序列特征构建特异性shRNA载体,转染培养的人TCFs.MTT比色法检测细胞的增生情况;ELISA法检测shRNA对TGF-β2蛋白表达的抑制作用.结果 TGF-β2 shRNA转染组的细胞增生及TGF-β2蛋白的表达均受到抑制.转染24、48、72h后MTT比色法检测显示,TGF-β2 shRNA转染组培养的Tenon囊的成纤维细胞的增生值分别为0.5426±0.05、0.5210±0.03、0.4055±0.04,明显低于阴性对照组的0.5655±0.03、0.5378±0.03、0.5268±0.04,3个组和各时间点的总体差异均有统计学意义(F组=54.691,P=0.000;Ftime=66.888,P=0.000).ELISA法检测显示,TGF-β2 shRNA转染组TGF-β2蛋白的表达水平下降,24、48、72h TGF-β2蛋白的表达量分别为(543.58±25.32)、(400.26±30.74)、(202.72 ±23.24)ng/L,明显低于阴性对照组的(659.78±20.95)、(547.45±24.65)、(442.87±17.43)ng/L 及空白组的(721.75±30.19)、(756.61±30.19)、(787.60±18.37) ng/L,3个组和各时间点的总体差异均有统计学意义(F组=163.082,P=0.000;F时间=31.498,P=0.000).结论 TGF-β2特异性shRNA能显著抑制人TCFs TGF-β2的表达,载体介导的TGF-β2特异性shRNA对眼前节术后的抗瘢痕化治疗具有潜在的可能性。
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