Test kit development for serological diagnostics of hepatitis E and checking of their diagnostic effectiveness on clinical material from endemic and non-endemic regions

Abstract

The results of the innovative pilot project for kit development for hepatitis E serum-diagnostic assays of the Interstate Program for Innovative Cooperation of the CIS member states for the period up to 2020 are presented. The project was carried out by I.I. Mechnikov Federal State Medical Research Institute for Vaccines and Sera in association with the National Institute of Public Health of the Ministry of Health of the Kyrgyz Republic and Belarusian medical and veterinary research institutions. As a result of research recombinant antigens of the prevalent in the CIS countries HEV genotypes 1 and 3 were developed, and a set of diagnostic assays was made, namely: test for quantification of IgG antibodies to HEV, test for determination the avidity of IgG antibodies to HEV, test for measuring the total antibodies to HEV, test for detection IgM antibodies to HEV, test for detection HEV antigen, confirmation test for detection antibodies to HEV by linear immune assay, immune-chromatographic rapid test for detection the antibodies to HEV and a high-precision test for detection HEV RNA in sera and plasma by PCR. The results of serum epidemiological and molecular epidemiological studies performed in the regions of Russia, Kyrgyzstan and Belarus indicated a consistent increase proportion of hepatitis E in the structure of acute hepatitis cases in these countries with the avoidance of a large number of the cases from diagnosis and registration. Представлены результаты выполнения инновационного пилотного проекта по созданию тест-систем для серодиагностики гепатита Е Межгосударственной программы инновационного сотрудничества государств – участников СНГ на период до 2020 года. Проект выполнялся совместно ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова, Национальным институтом общественного здоровья Министерства Здравоохранения Кыргызской Республики и научно-исследовательскими учреждениями медицинского и ветеринарного профилей Республики Беларусь. В результате проведенных исследований были разработаны рекомбинантные антигены доминирующих на территории стран СНГ 1 и 3 генотипов ВГЕ и на их основе создан комплекс иммуноферментных тест-систем: для количественного определения IgG-антител к ВГЕ, для определения авидности IgG-антител к ВГЕ, для определения суммарных антител к ВГЕ, для определения IgM-антител к ВГЕ, для детекции антигена ВГЕ, а также подтверждающая тест-система для определения антител к ВГЕ методом линейного иммуноанализа, иммунохроматографический экспресс-тест для выявления антител к ВГЕ и высокоточная тест-система для выявления РНК ВГЕ в сыворотке и плазме крови методом ПЦР. Результаты серо-эпидемиологических и молекулярно-эпидемиологических исследований, проведенных в регионах России, Кыргызстана и Беларуси, свидетельствовали о последовательном увеличении доли ГЕ в структуре заболеваемости острыми гепатитами на территории всех трех стран с ускользанием большого числа случаев заражения от диагностики и регистрации. КМШга мүчө-мамлекеттердин 2020-жылга чейинки мезгилге Инновациялык кызматташтыктын мамлекеттер аралык программасынын Е гепатитин серодиагностикалоо үчүн тесттик системаларды түзүү бою нча инновациялык пилоттук долбоорду ишке ашыруунун жыйынтыктары сунушталды. Долбоор И.И. Мечников атындагы Федералдык мамлекеттик бюджеттик мекемеси жана Кыргыз Республикасынын Саламаттык сактоо Министрлигинин коомдук саламаттыкты сактоо улуттук институту, Беларусь Республикасынын медициналык жана ветери нария илим-изилдөө профилиндеги илимий-изилдөө мекемелери менен ишке ашырылып жатат. Изилдөөнүн жыйынтыгында КМШ өлкөлөрүндө басымдуулук кылган 1 жана 3 ВГЕ генотиптеринин, ВГЕге IgG антителолорун санын, ВГ Еге IgG антителолорунун активдүүлүгүн, ВГЕге суммардык антителосун, ВГЕге IgM антителолорун, ВГЕнин антигенине детекциясын аныкташ үчүн рекомбинанттуу антигендери иштелип чыккан жана ошондой эле сызыктуу иммундук анализди колдонуу менен ВГЕге антителолорду аныктоо үчүн ырастоочу тест системасы, ВГЕге антителолорду аныктоо үчүн иммунохроматографиялык экспресс-тест жана ПТРдин жардамы менен кан сары суусунда жана кан плазмасында ВГЕге РНКсын аныктоо үчүн жогорку тактыктагы тест системасы иштелип чыкты. Россия, Кыргызстан жана Беларусия өлкөлөрүндө жүргүзүлгөн сероэпидемиологиялык жана молекулярдык эпидемиологиялык изилдө өлөрдүн натыйжалары үч өлкөдө тең курч гепатит менен ооругандардын структурасында тастыктоодон жана каттоодон качкан гепатиттин үлүшүнүн ырааттуу көбөйгөнүн көрсөттү.