Abstract
Produced have been stabilized phase variants of V. cholerae El Tor P-18895 (O- and rugose colonies). Frequency of reversion to initial ST-phenotype does not exceed 10 %. Identity of the origin is verified in VNTR. Evaluated has also been their activity by means of the following diagnostic tests: agglutination assay, sensitivity to diagnostic bacteriophages test, and studies of growth behavior in solid nutrient media. Stabilized variants of V. cholerae El Tor P-18895 can be deployed for further investigations of peculiarities of biofilm formation on various surfaces, bacterial resistance to environmental factors, and for the enhancement of methods for isolation of cholera vibrio variants from ambient environment.
Highlights
Материалы и методыВ работе использованы токсигенные штаммы V. cholerae El Tor Р-18895, Р-4696, V. cholerae classical Р-1391 (ctx+, tcp+, Hly–) и атоксигенные штаммы V. chole rae El Tor Р-18943, Р-18960 (ctx–, tcp–, Hly+) из музея Ростовского-на-Дону научно-исследовательского противочумного института, ранее охарактеризованные как продуценты ЭПС [6]
Produced have been stabilized phase variants of V. cholerae El Tor P-18895 (O- and rugose colonies)
Identity of the origin is verified in VNTR
Summary
В работе использованы токсигенные штаммы V. cholerae El Tor Р-18895, Р-4696, V. cholerae classical Р-1391 (ctx+, tcp+, Hly–) и атоксигенные штаммы V. chole rae El Tor Р-18943, Р-18960 (ctx–, tcp–, Hly+) из музея Ростовского-на-Дону научно-исследовательского противочумного института, ранее охарактеризованные как продуценты ЭПС [6]. Для получения ругозных колоний использовали среду М9 (рН 9,0) следующего состава: Na2HPO4 – 6 г/л, KH2PO4 – 3 г/л, NaCl – 0,5 г/л, NH4Cl – 1 г/л, CaCl2·2H2O – 0,01 г/л, MgSO4·7H2O – 0,49, LiCl – 0,01 г/л, казаминовые кислоты – 5 г/л, глюкоза – 0,1 г/л, манноза – 1 г/л, вода дистиллированная. В 5 мл среды М9 готовили суспензию клеток холерных вибрионов до конечной концентрация 106 КОЕ/мл и инкубировали две недели при комнатной температуре (25 °С), после этого высевали на агар Мартена (рН 7,7). Диссоциативный спектр бактериальной популяции определяли при рассеве 0,1 мл культур на агаризованные среды. Для подтверждения идентичности происхождения ругозных, ST- и О-вариантов V. cholerae использовали ПЦР. У ругозных вариантов токсигенных штаммов определяли наличие генов ctx, toxR, tcp и zot. Для изучения особенностей роста холерных вибрионов использовали стандартные плотные среды: LB (рН 7,3), Мартена (рН 7,7) и TCBS (рН 8,6). Фотографирование колоний вибрионов проводили с помощью стереомикроскопа МБС-10 (Россия)
Sign-in/Register to view highlights & summary Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a callDisclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.
