Influencia de sistemas buffer en la interacción entre una biblioteca de ADN aleatorio y células de Salmonella typhimurium.

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Introducción. Salmonella entérica subsp. entérica ser. Typhimurium (S. typhimurium) es una bacteria gramnegativa de gran relevancia para la salud pública debido a su capacidad de transmitirse a través de alimentos, causando diversas enfermedades conocidas colectivamente como salmonelosis. El desarrollo de sistemas de detección rápidos y específicos para este microorganismo es crucial para fortalecer los programas de control de calidad alimentaria y prevenir brotes infecciosos. Esta necesidad resalta la importancia de estudiar nuevos enfoques de diagnóstico, como aquellos basados en aptámeros, que suelen generarse mediante la técnica SELEX. Los parámetros de esta técnica son definidos por cada grupo de investigación y afectan directamente las capacidades de reconocimiento de los aptámeros hacia sus objetivos. Objetivo. En este estudio, evaluamos la influencia de tres sistemas tampón diferentes y de concentraciones variables de cloruro de magnesio (MgCl₂) en la capacidad de unión de una biblioteca aleatoria de ADN monocatenario a células de S. typhimurium. Materiales y Métodos. Las células de S. typhimurium se incubaron con secuencias de ADN aleatorias en presencia de tampones buffer salino fosfato (PBS), Tris buffer salino (TBS) o Tris nitrato de potasio (TK), con diferentes concentraciones de MgCl₂. Las secuencias no unidas o débilmente unidas se separaron por centrifugación y se cuantificaron mediante qPCR. Las diferencias estadísticas entre las condiciones experimentales se analizaron utilizando ANOVA. Resultados. El sistema tampón utilizado no afectó significativamente la recuperación de secuencias de ADN unidas a las células de S. typhimurium a una concentración constante de MgCl₂. Sin embargo, las variaciones en la concentración de MgCl₂ influyeron significativamente en el número de secuencias unidas a las células de S. typhimurium. Conclusiones. La interacción entre las secuencias de ADN y las células de S. typhimurium aumentó a una concentración de MgCl₂ de 2,5 mM en el tampón TBS.