РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПРИГОТОВЛЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ КРАСИТЕЛЕЙ НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТОВ БУЗИНЫ ЧЕРНОЙ, БАРХАТЦЕВ РАСПРОСТЕРТЫХ И ДОННИКА ЛЕКАРСТВЕННОГО

Tat'Iana Aleksandrovna Ishunina,Svetlana Gennad'Evna Boeva

doi:10.14258/jcprm.2017021171

Abstract

On the basis of ethanol extracts of fruits of black elderberry ( Sambucus nigra L.), marigold ( Tagetes patula L.) and melilot ( Melilotus officinalis L.) flowers new histological dyes were obtained. Anthocyanins of elderberry fruits that contain a positively charged oxygen provide basic properties of the corresponding dye, which selectively stains the nuclei and the basophilic structures of the cytoplasm. Donor-acceptor bonds between the heterocyclic oxygen atom of anthocyanins and a metal-complexing agent (copper) in the copper sulfate play an important role in the staining mechanism. Flavonoids of the marigold and melilot flowers, by contrast, show weakly acidic properties due to the presence of hydroxyl groups and predominantly stain the cytoplasm and the cell membrane. The chemical mechanism of the staining can be explained by the formation of stable complexes between ferric ions and phenolic hydroxyl and carbonyl groups of flavonoids. In this regard, the new stains should be considered as mordant dyes. Their advantages include the availability and wide distribution of vegetable raw materials, usage of nontoxic and affordable ingredients, easy preparation of solutions and the possibility of their long-term storage and reuse. Moreover, the nuclear dye from black elderberry can be used for combined histological staining with cytoplasmic dyes based on the marigold and melilot flowers.

Highlights

Экспериментальная частьДля получения гистологических красителей спелые плоды бузины черной были собраны в начале сентября, цветки донника лекарственного – в первой половине июля, цветки бархатцев распростертых – во второй половине июля и августе на территории Курской области
РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПРИГОТОВЛЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ КРАСИТЕЛЕЙ НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТОВ БУЗИНЫ ЧЕРНОЙ, БАРХАТЦЕВ РАСПРОСТЕРТЫХ И ДОННИКА ЛЕКАРСТВЕННОГО*
На основе флавоновых и флавоноловых соединений цветков бархатцев распростертых и донника лекарственного получены цитоплазматические красители, которые можно использовать совместно с ядерными красителями растительного происхождения

Summary

Экспериментальная часть

Для получения гистологических красителей спелые плоды бузины черной были собраны в начале сентября, цветки донника лекарственного – в первой половине июля, цветки бархатцев распростертых – во второй половине июля и августе на территории Курской области. Для экстрактов бузины наилучшие результаты окрашивания получены при соотношении 1,8 : 1 и 2 : 1. Для цветков донника лекарственного и бархатцев распростертых оптимальное время настаивания – от недели до месяца, для экстракции возможно использование 70% спирта. 3. Настаивание при комнатной температуре (для плодов бузины 10–17 дней, для цветков донника и бархатцев от недели до месяца). Введение после нескольких дней настаивания 15-минутного нагревания спиртовых экстрактов на водяной бане при температуре 85–90 °С [12] в ряде случаев приводило к большей интенсивности окраски гистологических срезов. В этом случае сначала срезы помещают на 20 мин в раствор красителя, окрашивающего ядра клеток, затем срезы быстро споласкивают в 70% спирте и переносят в растворы красителей на основе донника лекарственного или бархатцев еще на 10 мин. В таблице электронного приложения представлены результаты изменения цвета экстрактов при добавлении растворов аммиака, натрия гидрокарбоната и в присутствии борной и лимонной кислоты

Результаты и обсуждение

Список литературы