A levana é formada por unidades de frutose e produzida por micro-organismos a partir da fermentação de um meio de cultura contendo sacarose e sais minerais. É um biopolímero com aplicações industriais usado na área alimentícia (fixador de cores e sabores, espessante e estabilizante) e também na farmacêutica (substituto de plasma sanguíneo, imunomodulador, anticarcinogênico e hipocolesterolêmico). Esse trabalho teve como objetivo abordar especificamente aspectos relacionados ao delineamento da produção de levana pela bactéria Zymomonas mobilis CCT 4494, variando os parâmetros de uma fermentação submersa. As condições para a fermentação e produção foram avaliadas por um planejamento fatorial e foi aplicada a metodologia de superfície de resposta. Os resultados demonstram que o baixo valor de p encontrado para o intercepto levana (Y1), indicou que os níveis estudados nesta pesquisa foram bem escolhidos e que o coeficiente de regressão da equação descreveu o experimento acima de 99% de confiança. Das variáveis independentes analisadas, a agitação e sua combinação binária com a temperatura apresentaram as maiores diferenças significativas nos resultados. O maior cultivo do biopolímero foi de 10,58 g.L-1 de levana. Os valores de levana e da biomassa reduziram significativamente em temperaturas superiores a 30 °C e o produto da fermentação, como o crescimento de Zymomonas mobilis CCT 4494, foram proporcionais ao aumento da concentração de sacarose testada.