An extracellular protease has been isolated from the culture medium of Penicillium roqueforti. The enzyme was purified by precipitation with ammonium sulfate, filtration on Bio-gel P 100 columns and chromatography on D.E.A.E.-cellulose columns The purified preparation was homogenous by gel filtration on Bio-gel P 60 and electrophoretical analysis at pH 9.0 and 5.0. The protease exhibited the properties of an acid protease: the optimum pH was 3.5 for casein or hemoglobin hydrolysis and for bovine trypsinogen activation; at 40°C, the enzyme is most stable in the range of pH 3.5 to 5.5; the optimum temperatures was 50°C. E.D.T.A., D.F.P. and sulfhydryl reagents induced no inhibition. The enzyme exhibited a milk clotting activity that was fifty times weaker that the activity of rennin. Its molecular weight, estimated by gel filtration was 33 400. Amino acid composition is: Lys15, His2, Arg1, Trp5, Asp33, Thr27, Glu16, Pro10, Gly40, Ala25, Cys2, Val21, Ile20, Leu21, Tyr14, Phe19. The properties of this protease were closely similar to that of P. janthinellum and Aspergillus oryzae. Une protéase exocellulaire a été isolée du milieu de culture de Penicillium roqueforti. L'enzyme a été puriflée par précipitation au sulfate d'ammonium, filtration su Bio-gel P 100 et chromatographie sur D.E.A.E.-cellulose. La préparation purifiée de protéase est homogène par électrophorèse à pH 9,0 et 5,0 et par filtration sur Bio-gel P 60. La protéase a les caractères d'une protéase acide: Le pH optimal est de 3,5 avec les substrats caséine, hémoglobine et trypsinogène de bœuf; à 40°C, la stabilité est maximale entre pH 3,5 et 5,5; la température optimale est de 50°C; l'E.D.T.A., le D.F.P. et les réactifs des groupes SH n'exercent aucune inhibition. La protéase coagule le lait mais, à activité protéolytique égale elle est 50 fois moins coagulante que la présure. Le poids moléculaire déterminé par filtration sur gel est de 33 400. La composition en acides aminés est la suivante: Lys15, His2, Arg1, Trp5, Asp33, Thr27, Ser37, Glu16, Pro10, Gly40, Ala25, Cys2, Val21, Ile20, Leu21, Tyr14, Phe19. De par ses propriétés, l'enzyme est proche des protéases acides de P. janthinellum et Aspergillus oryzae.