La resistencia a los antimicrobianos (RAM) representa unos de los problemas más importantes de salud mundial. En países en desarrollo, como América Latina, la RAM provoca miles de muertes cada año debido al bajo o limitado acceso a antibióticos y/o cuidado básico de salud. En esta región, la Amazonía alberga una gran biodiversidad que podría ser fuente para el descubrimiento de nuevas substancias antimicrobianas que podrían ayudar a enfrentar la RAM. La guayusa (Ilex guayusa Loes.) ha sido usada durante milenos por los nativos de esta región, y se ha reportado como fuente de compuestos bioactivos. Sin embargo, los compuestos bioactivos obtenidos, han sido mediante la aplicación de técnicas convencionales, pocas investigaciones han aplicado técnicas no convencionales de extracción como fluido supercrítico (ESC) o líquido presurizado (ELP) usando solventes o cosolventes polares. En el presente estudio evaluó la actividad antibacteriana y antifúngica de extractos de guayusa obtenidos mediante técnicas no convencionales ESC y PLE aplicando solventes/cosolventes polares y comparada con la técnica convencional de extracción por maceración. Los solventes/cosolventes usados en las diferentes extracciones fueron: CO2/agua, CO2/etanol/agua, etanol/agua o agua. A partir de la evaluación de la concentración inhibitoria mínima (CIM) de los extractos, se evidenció que presentaron actividad antifúngica contra diferentes dermatofitos: Microsporum canis, Microsporum gypseum, Trichophyton mentagrophytes and Trichophyton rubrum en el rango 1000 µg mL-1 a 62.5 µg mL-1. El presente estudio demostró el promisor potencial de los extractos de hojas de guayusa obtenidos mediante baja y alta presión para combatir problemas asociados a dermatofitos.