Ultrastructural visualization of virus-antibody binding by means of colloidal gold-protein A

Abstract

Application of the electron dense marker, colloidal gold, was demonstrated in immunoelectron microscopic studies on virus-infected cells. The colloidal gold was used for labelling of protein A which reacts with IgG of several species. Three different virus-cell systems and respective antisera from three species were employed for the tests. The results obtained indicate that the colloidal gold-protein A technique is preferable to commonly used immunoelectron microscopic methods. Three main advantages favour the use of this marker.o1)Due to its electron opacity, colloidal gold is easily visible in the electron microscope even at low magnifications.2)The high contrast of this marker allows double staining of the cells in the usual manner. Therefore, no loss of resolution occurs.3)Labelled with protein A, only one conjugated need be applied in combination with sera from different species. Due to its electron opacity, colloidal gold is easily visible in the electron microscope even at low magnifications. The high contrast of this marker allows double staining of the cells in the usual manner. Therefore, no loss of resolution occurs. Labelled with protein A, only one conjugated need be applied in combination with sera from different species. Un marqueur à haute densité électronique a été utilisé pour l'examen immunologique de cellules infectées par des virus (virus d'Aujeszky, virus de la leucémie murine, virus de l'anémie infectieuse de cheval). La protéine A est marquée avec de l'or colloïdal avant d'être utilisée à la détection des IgG de plusieurs espèces animales. Trois systèmes virus-cellules-anticorps différents ont été employés. Les résultats obtenus indiquent que la technique utilisant le complexe or colloïdal-protéine A est préférable aux autres méthodes actuellement utilisées. Elle présente les trois avantages suivants: (1) l'or possède une densité considérable, donc une visibilité permettant, en microscopie électronique, l'emploi de grossissements moyens; (2) le contraste élevé du marqueur permet une double coloration des cellules sans pertes par redissolution des marqueurs; et (3) avec la protéine A, on n'a besoin que d'un seul réactif conjugué pour l'étude des sérums des diverses espèces animales usuelles.