Abstract

目的 通过对层粘连蛋白(LN)、层粘连蛋白基因、RET基因在先天性巨结肠(HD)病儿狭窄段、移行段、正常段的表达研究,探讨HD的病因.方法用二步法对27例HD患儿狭窄段、移行段、正常段肠壁组织进行免疫组织化学染色,RS Image成像系统照相,JD801形态学图像分析软件判定阳性染色面积;用RT-PCR技术对LN基因及RET基因在三段肠壁的表达定性研究,美国alpha9900凝胶图像分析系统进行强度表达;用实时荧光定量PCR技术对LN基因及RET基因在三段肠壁的表达定量分析,采用7000型SDS应用软件相对定量2-(△)(△)Ct法比较各基因的表达差异;相应数据用SPSS11.5软件统计分析,推断LN的表达与HD的关系,并分析两基因表达的相关性及与HD发生的关系.结果层粘连蛋白及其基因在狭窄段表达明显增高,从狭窄段到正常段逐渐减低;而RET基因在狭窄段表达明显减低,从狭窄段到正常段逐渐增高,两者呈负相关.结论层粘连蛋白在无神经节细胞段表达增高是内在的,它引起肠壁神经嵴细胞的过早成熟定居导致HD的发生.层粘连蛋白基因与RET基因的表达呈负相关关系,对HD的形成两者可能存有某种内在的联系。

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