Abstract

Aim. A comparative study of serological methods for the detection of the causative agent of tularemia and their evaluation. Materials and methods. We used experimental diagnostic kits and test systems for the production of serological methods: indirect hemagglutination reaction (RGA); the reaction immunofluorescence (RIF); enzyme immunoassay (ELISA) using traditional microplate; IFA after selective concentration of the pathogen of tularemia in magnoimmunosorbents (MIS); microgravimetric analysis (MGA) based on piezoresistors (SP) and surface plasmon resonance (SPR). The experiments were carried out with homologous strains of tularemia microbe (test strains) and with strains of heterologous microorganisms in model experiments on tap water contaminated with different concentrations of the pathogen. Results. The parameters of each diagnostic method are determined and evaluated according to the following indicators: sensitivity (when working with pure cultures (test strains), contaminated samples of large volumes), specificity, time of setting and taking into account the results, informativeness, determining the modes of setting and accounting. Conclusion. The above diagnostic methods have their advantages and disadvantages. Therefore, when choosing a method, the researcher should be guided by the goals pursued. So, for screening studies it is advisable to carry out the formulation of ELISA, RIF, RGA, in identifying the pathogen in large volumes and contaminated samples, the effective use of selective concentration on MIS followed by the formulation of ELISA, to identify small amounts of samples and take into account the reaction in real time, it is possible to use MGA and SPR.

Highlights

  • Примечание. * С учетом сенсибилизации планшет в холодильнике при температуре 4-6°С/ в термостате при температуре (37±2)°С; ** модельный опыт с контаминированными пробами

  • Ключевые слова: вирус краснухи штамм RA-27/3, генетическая стабильность, метод полиморфизма длин рестрикционных фрагментов

Read more

Summary

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ И ИХ ОЦЕНКА

Использованы экспериментальные диагностические наборы и тест-системы для постановки серологических методов: реакции непрямой гемагглютинации (РНГА); реакции иммунофлуоресценции (РИФ); иммуноферментного анализа (ИФА) традиционного с использованием микропланшет; ИФА после селективного концентрирования возбудителя туляремии на магноиммуносорбенте (МИС); реакции микрогравиметрического анализа (МГА) на основе пьезобиосенсоров (ПБ) и поверхностного плазмонного резонанса (ППР). Для скрининговых исследований целесообразно проводить постановку ИФА, РИФ, РНГА; при выявлении возбудителя в больших объемах и загрязненных пробах эффективно применение селективного концентрирования на МИС с последующей постановкой ИФА; для выявления незначительных объемов проб и учета реакции в реальном времени возможно применение МГА и ППР. В настоящее время для индикации возбудителя туляремии применяют ряд диагностических серологических методов, в основе которых лежит высокоселективное взаимодействие «антиген-антитело»: реакция непрямой гемагглютинации (РНГА), реакция иммунофлуоресценции (РИФ), иммуноферментный анализ (ИФА) без/с применением магноиммуносорбентов (МИС), микрогравиметрический анализ (МГА), анализ поверхностного плазмонного резонанса (ППР).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
РЕЗУЛ ЬТАТ ЫИОБСУЖДЕНИЕ
Отрицательный Отрицательрезультат ный результат
Full Text
Published version (Free)

Talk to us

Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have

Schedule a call