Role of SPHK1 regulates multi-drug resistance of small cell lung cancer and its clinical significance

Abstract

背景与目的小细胞肺癌约占全部肺癌的15%，化疗是其主要的治疗方法之一，虽然早期对一线化疗方案敏感，但极易出现多药耐药而导致治疗失败。前期基因芯片发现SPHK1与小细胞肺癌的耐药性相关，本研究进一步探讨SPHK1在小细胞肺癌多药耐药中的作用。方法首先通过QRT-PCR和Western blot从基因和蛋白水平检测化疗敏感细胞株H69及多药耐药细胞株H69AR中SPHK1的差异表达；转染siRNA下调H69AR细胞中的SPHK1的表达，通过CCK8检测细胞对各种化疗药物（ADM, DDP, VP-16）的敏感性变化，流式细胞仪检测细胞周期及凋亡的变化。同时收集小细胞肺癌化疗前组织和血液标本，将其分为化疗敏感组和耐药组，QRT-PCR检测小细胞肺癌患者血液标本中SPHK1的表达，免疫组化法检测小细胞肺癌患者组织标本中SPHK1的表达，分析SPHK1与小细胞肺癌患者预后相关性。结果SPHK1在耐药细胞H69AR中的表达明显高于H69，下调H69AR中SPHK1的表达能够增加细胞对化疗药物的敏感性，促进细胞的凋亡，细胞周期发生G0/G1期阻滞，SPHK1在小细胞肺癌耐药患者中的表达较敏感患者明显增加，SPHK1的表达与患者的性别、年龄无关，与疾病的分期、对化疗的敏感性及生存时间密切相关，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论SPHK1参与调节小细胞肺癌多药耐药，SPHK1可作为评估小细胞肺癌化疗敏感性及临床预后的潜在靶基因。