Abstract
Metabolic impairment of alpha-synuclein protein is considered to be the central event in PDpathogenesis. Recent studies explored usage of alpha-synuclein in peripheral fluids as a biomarker of PD, however alpha-synuclein level in the CSF and plasma is considered to be affected by hemolysis. In order to avoid contamination of a lymphocyte fraction by erythrocytes, we have proposed an algorithm based on measurements of alpha-synuclein levels in the homogeneous CD45+ cell blood fraction. For this study we formed a group of PD patients (N=14) and a control group without the neurological disorders (N=17). We found an increase in the level of the total alpha-synuclein in CD45+ cells of PD patients compared to controls (p = 0,04), and revealed a direct correlation between the level of dopamine in plasma and level of total alpha-synuclein in CD45+ cells in the control group (r=0,71, p = 0,007).The level of alpha-synuclein in CD45+ cells could be suggested as possible PD biomarker.
Highlights
В случае обнаружения статистически зна чимых различий проводилось последующее попар ное сравнение вариационных рядов исследуемых групп с использованием непараметрического кри терия Манна–Уитни для двух независимых выбо рок
У всех пациентов измеряли антропометрические показатели, определяли уровень апелина в плазме
Summary
В исследование вошли пациенты с вновь диаг ностированными случаями БП (N=14, средний возраст – 62,8±9,97 года (от 42 до 80 лет)), не полу чавшие лечения препаратами Л ДОФА, а также обследуемые контрольной группы (N=17; средний возраст – 68,6 года, от 53 до 86 лет) с отсутствием неврологических расстройств. Исследование было одобрено этическим комитетом ПСПбГМУ им. Выделение CD45+ клеток было проведено мето дом магнитного сортинга с использованием маг нитного ручного сепаратора MACS (MiltenyiBiotec, США) и колонок miniMACS типа MS (MiltenyiBiotec, США) изнезамороженной периферической крови. Лизис клеток осуществлялсяс использованием на бора TotalProteinExtractionKit (Chemicon (Millipore), США). Измерение общего белка в клеточных лиза тах было проведено с использованием набора Pierce BCA ProteinAssaykit (ThermoScientific, США). В дальнейших экспериментах были использованы образцы клеточных лизатов, выравненные по кон центрации общего белка (по 6 мкг в образце). Оценка альфа синуклеина проводилась мето дом иммуноферментного анализа (ИФА) с исполь зованием набора Humanalpha synuclein ELISA kit (Invitrogen, США). Оценку уровня до фамина плазмы крови проводили методом ИФА с набором для исследования дофамина в физиоло гических жидкостях (DopamineResearchELISAAE 5300, LaborDiagnostikaNordGmbh&Co. KG, США). Статистическая обработка данных была прове дена с использованием программы «SPSS» версия 12.0. Сравнение получен ных значений между отдельными группами пред полагало использование непараметрического
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
More From: The Scientific Notes of the I. P. Pavlov St. Petersburg State Medical University
Disclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.