Abstract
/cell, using maintenance media 199 with admixture of 0.1 % human serum albumin or 2 % bovine serum. Optimum media volume in the roll-bottle for fixed rabies virus strain, “Moscow 3253”, cultivation is 200-400 ml. It depends upon the proliferating surface area. Specifications stated above provide for the obtainment of culture liquid with rabies virus titer - 1:256 - 1:512, if assayed in ELISA. This cultural virus is recommended as a basis for immunization material obtainment with a view to produce anti-rabies immunoglobulin from equine blood serum.
Highlights
Выращивание клеточной культуры осуществляли вРоллерное культивирование проводили в закрытых сосудах для культивирования клеточных культур с площадью поверхности 850 и
Studied are the parameters for roll-bottle cultivation of the production fixed rabies virus strain, “Moscow 3253”, in the Vero cell culture
Specifications stated above provide for the obtainment of culture liquid with rabies virus titer – 1:256 – 1:512, if assayed in ELISA
Summary
Роллерное культивирование проводили в закрытых сосудах для культивирования клеточных культур с площадью поверхности 850 и. Для выращивания клеток Vero использовали среду Игла МЕМ с добавлением 10 % сыворотки крупного рогатого скота. Репродукцию вируса осуществляли на поддерживающей среде 199 с добавлением человеческого сывороточного альбумина (ЧСА) или сыворотки КРС. Для промывания клеточного монослоя от остатков среды и продуктов обмена использовали раствор Дальбекко (DPBS). Для открепления клеток с ростовой поверхности применяли раствор трипсина и версена в соотношении 1:2. Подсчет количества жизнеспособных клеток осуществляли в камере Горяева. При работе учитывали сроки образования монослоя, морфологию клеток и индекс пролиферации (ИП) – отношение конечной концентрации клеток к исходной. Эффективность репродукции исследуемого штамма вируса бешенства оценивали титрованием вируса на белых мышах [9], а также методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием набора для лабораторной диагностики вируса бешенства (ФГУ «ФЦТРБ ВНИВИ», Казань). ИФА осуществляли в соответствии с инструкцией к набору.
Published Version
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have