Large scale preparation of rabbit liver tRNA. Isolation of tRNAs specific for methionine, phenylalanine, serine, tryptophan and valine.

Abstract

A simplified method for the large scale preparation of crude rabbit liver tRNA is described. About five grams of this material is obtained for which different physicochemical and biological properties are given. Chromatographic techniques and phenoxyacetylation procedure allow us to purify tRNAs specific for methionine, phenylalanine, serine, tryptophan and valine. Specific activities of these different tRNAs range from 1,350 to 1,800 pmoles of aminoacid per A 260 unit (*). L'association de divers procédés classiques a permis la préparation rapide de quantités importantes de t-RNA brut de foie de lapin. Quelques propriétés physico-chimiques et biologiques de ce matériel sont présentées. Son fractionnement chromatographique sur colonnes de BD-Cellulose et de DEAE-Sephadex, ainsi que l'utilisation conjointe de la technique de phénoxyacetylation conduit à la purification des t-RNA spécifiques de la méthionine, de la phénylalanine, de la sérine, du tryptophane et de la valine. Ces divers t-RNA ont une activité spécifique comprise entre 1350 et 1800 picomoles d'acide aminé par unité de densité optique. L'utilisation systématique des techniques décrites permet d'envisager favorablement l'isolement de tout t-RNA spécifique. Durch die Verwendung verschiedener bekannter Verfahren werden grosse Mengen von Gesamt-tRNS aus Kaninchenleber gewonnen. Einige physico-chemische und biologische Eigenschaften dieses Materials werden angegeben. Durch chromatographische Analysen an BD-Zellulose- und DEAE-Sephadex-säulen werden die Methionin-, Phenylalanin-, Serin-, Tryptophan-, und Valin-spezifischen t-RNS gereinigt. In besonderen Fällen wurde die Phenoxyacetylierung verwendet. Die spezifische Aktivität dieser verschiedenen t-RNS liegt zwischen 1 350 und 1 800 Picomol Aminosäuren pro A200. Die systematische Anwendung dieser Verfahren würde eine günstige Lösung zur Isolierung irgendeinen spezifischen t-RNS ermöglichen.