Indexação biológica múltipla e RT-PCR para detecção de vírus latentes em macieiras

Abstract

O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade da indexacao biologica multipla de virus latentes de macieiras em indicadoras lenhosas. O metodo consistiu na enxertia de cinco especies de indicadoras e duas borbulhas da cultivar a ser indexada em um unico porta-enxerto. Concluiu-se que a eficacia e a sensibilidade do metodo biologico multiplo e adequada para a deteccao confiavel de Apple stem grooving virus (ASGV), Apple stem pitting virus (ASPV) e Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV) em programas de limpeza clonal e certificacao de matrizes de fruteiras. A RT-PCR confirmou o diagnostico biologico de ASPV e ASGV. Entretanto, ACLSV diagnosticado pela indicadora LL-S5 nao foi detectado por RT-PCR em tres dos nove acessos analisados. O gene de proteina capsidica de ACLSV de um dos acessos estudados foi clonado e sequenciado; a regiao de pareamento dos iniciadores de PCR foi comparada com dados do Genbank como subsidio a interpretacao da nao amplificacaode certos isolados de ACLSV.