Abstract
The aim of this work was a simultaneous analysis of functional platelet activity using both standard optical aggregometry and flow cytometry, by means of measuring P-selectin and GP IIb-IIIa glycoprotein receptor contents on the surface of ADP-induced platelets. GP IIb-IIIa amounts and P-selectin expression on cell surface are significantly increased on platelets after activation with 10 mcM ADP, both in normal donors and in aspirin-treated patients. In clopidogrel-treated patients, the amounts of expressed P-selectin and GP IIb-IIIa did not change after ADP induction, thus suggesting absence of detectable ADP-induced platelet activation in this group. By means of Spearman criterion, a distinct correlation was found between the P-selectin expression, GP IIb-IIIa contents, and rates of standard ADP-induced aggregation. A combination of standard ADP-induced aggregation/activation of platelets with flow cytometry using FITC or PE-labeled antibodies to P-selectin and GP IIb-IIIa, allowed us to apply immunological approaches to analysis of platelet hemostasis, to propose novel laboratory criteria for evaluation of platelet hyperaggregation, and to detect differential effects of clopidogrel and aspirin.
Highlights
P-selectin expression, GP IIb-IIIa contents, and rates of standard ADP-induced aggregation
The aim of this work was a simultaneous analysis of functional platelet activity using
P-selectin expression on cell surface are significantly increased on platelets after activation
Summary
Сироткина О.В.1, 2, Боганькова Н.А.1, Ласковец А.Б.1, Кухарчик Г.А.1, Гайковая Л.Б.1, Вавилова Т.В.1. В работе представлено одновременное исследование функциональной активности тромбоцитов методами стандартной оптической агрегатометрии и проточной цитометрии с оценкой изменения содержания Р-селектина и гликопротеинового рецептора GP IIb-IIIa на поверхности тромбоцитов при индукции АДФ. Количество рецептора GP IIb-IIIa и экспрессия Р-селектина на поверхности тромбоцитов достоверно увеличиваются при активации 10мкМ АДФ как в контрольной группе доноров, так и у больных, принимающих только аспирин. У пациентов на фоне клопидогрела при индукции не происходило значимого изменения количества GP IIb-IIIa на поверхности тромбоцитов, а также не увеличивалось число клеток, экспрессирующих на своей поверхности Р-селектин, то есть не наблюдалась активация тромбоцитов в ответ на АДФ. Соединение принципа активации с АДФ, который заложен в стандартной индуцированной агрегации, и проточную цитофлуориметрию с использованием FITCи PE-меченных антител к рецептору GP IIb-IIIa и Р-селектину позволило нам применить иммунологические методы для анализа тромбоцитарного гемостаза и выявить новые лабораторные критерии для оценки гиперагрегации тромбоцитов и эффективности действия клопидогрела и аспирина. Immunological methods for evaluation of platelet functions in the patients with cardiovascular diseases
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Disclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.