Abstract
It is shown that the introduction of granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) in patients with chronic heart failure increases the functional activity of peripheral blood mononuclear cells (MNC). Enriching peripheral blood MNCs with progenitor cells (PC) by mobilization of bone marrow leads to an increase of their proliferative capacity both under spontaneous culture conditions and when stimulated with ConA mitogen and cytokines G-CSF. Proliferative activity of MNCs is found to increase, as the number of CD34+ PC starts growing. It is also noted that MNCs produce a wide range of cytokines with regulatory action after mobilization in a 48-hour culture in vitro. The findings suggest the feasibility of using MNCs after G-CSF mobilization for stimulation of reparative processes in the myocardium.
Highlights
Материал и методыИсследование проведено у 35 пациентов с ИБС, III-IV ФК ХСН (NYHA), давших информированное согласие согласно протоколам, утвержденным этическими комитетами и учеными советами Новосибирского научноисследовательского института патологии кровообращения им. акад.
Уровень пролиферативной активности МНК крови исследовали в триплетах (2 × 105 клеток/лунка) в спонтанном и стимулированном тестах в присутствии 5 мкг/ мл митогена Конканавалина А (Кон А, Sigma, США), G-CSF (50 Ед/мл; Grasalva, Израиль) и Epo (33 Ед/мл; Рекормон, США) на спектрофотометре (Stat Fax 2100, США) при длине волны 492 нм по включению клетками 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолиум бромида (Sigma, США) и преобразования его в формазан митохондриальными дегидрогеназами.
Содержание в супернатантах МНК 9 цитокинов (IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, IL-13, TNF-α, INF-γ, GM-CSF) оценивали методом проточной флюориметрии на двулучевом лазерном автоматизированном анализаторе (BioPlex Protein Assay System, BioRad, США) с использованием коммерческих тест-систем в соответствии с инструкцией фирмы-производителя.
Summary
Исследование проведено у 35 пациентов с ИБС, III-IV ФК ХСН (NYHA), давших информированное согласие согласно протоколам, утвержденным этическими комитетами и учеными советами Новосибирского научноисследовательского института патологии кровообращения им. акад. Уровень пролиферативной активности МНК крови исследовали в триплетах (2 × 105 клеток/лунка) в спонтанном и стимулированном тестах в присутствии 5 мкг/ мл митогена Конканавалина А (Кон А, Sigma, США), G-CSF (50 Ед/мл; Grasalva, Израиль) и Epo (33 Ед/мл; Рекормон, США) на спектрофотометре (Stat Fax 2100, США) при длине волны 492 нм по включению клетками 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолиум бромида (Sigma, США) и преобразования его в формазан митохондриальными дегидрогеназами. Содержание в супернатантах МНК 9 цитокинов (IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, IL-13, TNF-α, INF-γ, GM-CSF) оценивали методом проточной флюориметрии на двулучевом лазерном автоматизированном анализаторе (BioPlex Protein Assay System, BioRad, США) с использованием коммерческих тест-систем в соответствии с инструкцией фирмы-производителя. Что же касается индекса стимуляции пролиферативной активности МНК, полученных после мобилизации, то при стимуляции митогеном КонА был отмечен максимальный прирост пролиферирующих клеток МНК пациентов с содержанием после мобилизации клеток, экспрессирующих CD34 маркер >0,4%, пролифе-
Sign-in/Register to view highlights & summary Sign-in/Register to access full text options 
Free) 
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a call
