櫻絨花(Emilia fosbergii Nicolson)與紫背草(E. sonchifolia L. var. javanica)之分子鑑定

Abstract

櫻絨花(Emilia fosbergii Nicolson)為菊科紫背草屬一年或二年生草本植物，原生於非洲地區，現已成為臺灣農地的入侵雜草。由於櫻絨花與同屬植物紫背草(E. sonchifolia L. var. javanica)的植株形態極為相似，未開花之前不易區別，造成鑑定上的困擾。分子標誌己普遍運用於植物種類之鑑別，本研究針對櫻絨花與紫背草5.8S rRNA-ITS核酸序列進行選殖及解序，並建立PCR-RFLP、multiplex PCR及ISSR的分子標誌。櫻絨花與紫背草的ITS1-5.8S rRNA-ITS2序列長度不同，分別為643 bp 及641 bp，一致性(identity)為90.7%。經由ITS 序列比對，2者之間有Nsi I、Sph I 及Xho I 3種限制酵素切位的差異，5.8S rRNA-ITS核酸片段經3種限制酵素反應，故發展PCR-RFLP鑑定方法；另於ITS 序列差異處設計專一性引子，建立multiplex-PCR鑑定方法，可分別於櫻絨花與紫背草增幅678 bp 及340 bp片段；此外利用ISSR 587引子增幅1.0-2.1 kb之間的多型性條帶，可明顯區別櫻絨花與紫背草。multiplex-PCR 及ISSR兩種分子標誌具有簡易、快速及明確等特點，可應用於入侵植物的監測及管理，進而維護臺灣原生物種之生態多樣性與平衡。