Abstract
Os objetivos deste trabalho foram estabelecer um protocolo eficiente de embriogênese somática, em híbridos triploides entre capim elefante (Pennisetum purpureum Schumach.) e milheto (P. glaucum (L.) R. Br.), e avaliar por citometria de fluxo a estabilidade genômica das plantas obtidas in vitro. A embriogênese somática e a regeneração das plantas foram estabelecidas a partir de embriões zigóticos maduros de híbridos entre capim elefante e milheto. Foram testados quatro tratamentos com 2,4 ácido diclorofenoxiacético (2,4 D), nas concentrações 0, 1, 2 e 3 mg L-1, para indução de calos embriogênicos, e dois tratamentos com inositol a 1 e 2 g L-1, para regeneração das plantas. Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente ao acaso. A combinação ótima de hormônios foi de 2 mg L-1 de 2,4 D, para indução de calos embriogênicos, e de 1 g L-1 de inositol, para conversão de embriões e regeneração de plantas. A análise de quantidade de DNA, por citometria de fluxo das plantas regeneradas, indicou a não ocorrência de alterações em ploidia durante a embriogênese somática e a regeneração das plantas. A quantidade de DNA nuclear e a ploidia das plantas regeneradas foram estáveis e homogêneas em comparação às das plantas controle. Não ocorreu instabilidade cariotípica no sistema de regeneração usado para híbridos de Pennisetum.
Highlights
Um dos mais importantes gêneros da família Poaceae é o Pennisetum (Martel et al, 2004)
Marie & Brown (1993) propuseram coeficientes de variação de 1 a 2%, para resultados de Intensidade de fluorescência
Plant Cell, Tissue and Organ Culture, v.89, p.211-216, 2007
Summary
Sementes triploides oriundas do cruzamento entre os parentais F91-2-5 (capim-elefante) e M-31 (milheto) foram utilizadas nos experimentos. Embriões maduros foram extraídos a partir das sementes e utilizados para indução de embriogênese somática em quatro tratamentos de 2,4-D, nas concentrações 0, 1, 2 e 3 mg L-1, em meio MS (Murashige & Skoog, 1962) (Phytotechlab) com 30 g L-1 de sacarose e 6 g L-1 de ágar. Os embriões foram mantidos no escuro, a 25oC, por quatro semanas, para indução dos calos embriogênicos. Posteriormente, os calos que possuíam embriões maduros foram transferidos para meio MS em presença da luz, com o objetivo de induzir a formação de brotos e enraizamento (fase de conversão em plantas). Foram avaliadas três amostras de diferentes setores do tecido foliar, e cada uma delas foi considerada como uma repetição (delineamento inteiramente ao acaso com três repetições). A análise estatística dos dados foi realizada pelo programa WinMDI 2.8 (http://www. cyto.purdue.edu/flowcyt/software/Winmdi.htm)
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