Abstract

Mezotelyoma; kalp, akciğer ve karın gibi iç organların yüzeyini kaplayan mezotelyum dokusundan gelişen bir kanser türüdür ve tümörlerinin poliKlon al kökene sahip olduğu düşünülmektedir. Kapsaisinin kanser hücreleri üzerindeki apoptotik etkileri bilinmektedir. Bu çalışmada; H2452 mezoteliyomahücre hattından seçilmiş dört (I, II, III ve IV numaralı) Klon üzerinde kapsaisinin sitotoksisitesi ve kaspaz-3 ifadesine ve aktivasyonuna etkileri tespit edilmeye çalışılmıştır. Bu amaçla; öncelikle, Klon ların IC50 değerleri MTS [3-(4,5)-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-karboksimetoksifenil)-2-(4-sülfofenil)-2H-tetrazolyum] tuzunun formazana indirgenmesi metoduyla belirlenmiş ve kapsaisin sitotoksisitesinin bazı Klon lar arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark gösterdiği (p<0.01) ortaya konulmuştur. Daha sonra, seçilen Klon lara ortalama IC50 derişiminde (251.6 µM) kapsaisin uygulanmış ve hücre büyüme eğrileri çizilmiştir. Buna göre; 72 saat sonunda, Klon I’in diğer Klon lardan daha yüksek sayıda (p<0.001) canlı hücre içerdiği gözlenmiştir. Bunu takiben gerçekleştirilen qRT-PCR ve Western Blotlama ile; kapsaisin uygulanmış (KAP), etanol uygulanmış (EtOH) ve herhangi bir uygulama görmemiş, kontrol grubu hücrelerinde kaspaz-3 molekülünün sırasıyla mRNA ve protein seviyesindeki değişimler tespit edilmiştir. Sonuç olarak; kapsaisin sitotoksistesinin seçilen Klon ile anlamlı bir değişiklik gösterdiği tespit edilmiş, ve kaspaz-3 proteinin inaktif ve aktif biçimlerinin miktarı ile bağıl kaspaz-3 mRNA seviyesi her bir Klon için diğerlerinden farklı sonuçlar ortaya koymuştur. Tüm bulgular birlikte değerlendirildiğinde, mezotelyoma tümörlerini oluşturan hücre popülasyonlarının poliKlon al bir kökene sahip olabileceği fikri destekleniyor görünmektedir.

Highlights

  • Araştırma Makalesi Research Article number of viable cells (p

  • Mesothelioma is a type of cancer that develops from the mesothelium tissue that covers the surface of the internal organs such as the heart, lungs and abdomen, and its tumors are thought to have polyclonal origin

  • In this study; we tried to determine the cytotoxicity of capsaicin and its effects on caspase-3 expression and activation on four clones selected from the H2452 mesothelioma cell line

Read more

Summary

Keywords Mesothelioma Capsaicin CAP Tumor heterogeneity Apoptosis

KSÜ Tarım ve Doğa Derg 23 (5): 1125-1134, 2020 KSU J. By qRT-PCR and Western blotting performed following the application, mRNA and protein levels of caspase-3 molecule were determined in capsaicintreated (KAP), ethanol-treated (EtOH) and untreated control cells. Mezoteliyoma geleneksel kanser tedavileri ile tedavi edilememektetir ve hastalığa karşı etkili bir tedavi yöntemi henüz bulunamamıştır (Hiddinga ve ark., 2015). Nitekim mezoteliyoma tümörlerinin poliKlon al yapıda olduğu, yani tümörün birden fazla hücrenin başkalaşımıyla oluşan karma popülasyonlar içerdiği, temeli X kromozomunun seçimli inaktivasyonuna dayanan bir metotla ortaya konulmuştur (Comertpay ve ark.,2014). Malignant mezotelyomanın poliKlon al orijinli bir tümör olduğu gerçeğine dayanarak mezotelyumun kanserli hücrelerinden seçilen dört Klon üzerinde kapsaisin sitotoksistesinin nasıl değiştiği MTS [3-(4,5)-dimetiltiazol-2-il)-5-(3karboksimetoksifenil)-2-(4-sülfofenil)-2Htetrazolyum] ile, hücre büyüme hızları oluşturulan eğriler üzerinden değerlendirilirken, gözlenen ölümlerin apoptotik olup olmadığına ilişkin yorumda bulunabilmek için kaspaz-3 proteini ve onu kodlayan mRNA’nın seviyesi değerlendirilmiştir. Sonuçların kapsaisinin mezotelyoma üzerinde terapotik potansiyelinin değerlendirilmesi ve mezotelyoma tümörlerinin yapısının bilinmesi açısından önemli katkılarda bulunacağı düşünülmektedir

Hücre Kültürü
Klon Seçimi
Kapsaisin ve Etanol Uygulaması
Western Blotlama
İstatistiksel Analiz
BULGULAR ve TARTIŞMA
Findings
Araştırmacıların Katkı Oranı Beyan Özeti
Full Text
Paper version not known

Talk to us

Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have

Schedule a call