Abstract

Fluorescent in situ hybridization (FISH) and PCR were used for analysis of phylogenetic structure of anaerobic sulfate-reducing bacterial communities in oxygen-containing upper water layers of meromictic basins: the Black Sea and the Gdansk Deep of the Baltic Sea. In the Black Sea (continental slope at depths 30–70 m), cells of sulfate-reducing bacteria (SRB) hybridizing with 16S rRNA-specific FISH-probes for Desulfotomaculum, Desulfobacter, and Desulfovibrio genera were revealed, whereas Desulfomicrobium-related bacteria were prevalent in the chemocline zone at a 150-m depth. Besides Desulfotomaculum (SRB subgroup 1), Desulfobacter (SRB subgroup 4), and Desulfovibrio-Desulfomicrobium (SRB subgroup 6), nested PCR with the use of 16S rRNA gene-specific primers detected the presence of Desulfococcus–Desulfonema–Desulfosarcina (SRB subgroup 5) in the oxygen-containing water column of the Black and Baltic seas. Active enrichment SRB culture that contained bacterium Desulfosporosinus sp. as a major component was obtained from the Black Sea water sample collected at a 70-m depth.

Highlights

  • Материалы и методыВ Черном море водные образцы с глубин до 200 м отбирали с помощью CTD-зонда “Sea-Bird 19” (США), оснащенного 10-литровыми батометрами Нискина и погружным насосом, с борта НИС “Ашамба”

  • Особый интерес представляют микробные сообщества на границе аэробных и анаэробных вод

  • PCR were used for analysis of the phylogenetic structure

Read more

Summary

Материалы и методы

В Черном море водные образцы с глубин до 200 м отбирали с помощью CTD-зонда “Sea-Bird 19” (США), оснащенного 10-литровыми батометрами Нискина и погружным насосом, с борта НИС “Ашамба”. Для выделения тотальной ДНК по 5 л водных проб последовательно фильтровали через стекловолоконные фильтры GF/C (Whatman, США) и мембранные фильтры с диаметром пор 0,22 мкм (Millipore, США), затем их разрушали в жидком азоте и использовали набор Genomic DNA Purification Kit (Fermentas, Литва). Смесь для ПЦР содержала ~25 нг ДНК-матрицы; 2,0 мМ MgCl2; 400 мкМ дНТФ; по 500 нМ праймеров и 2,5 ед. Использовали праймеры на ген 16S рРНК Bacteria (pA и pH’) [12] и шести филогенетических подгрупп СРБ [7], а также на ген dsrB [13]. Идентификацию СРБ осуществляли по следующей схеме: амплифицировали участки гена 16S рРНК Bacteria с использованием выделенной ДНК и праймеров 341F/907R [16], клонировали полученные ампликоны в векторе pGEM-T

Результаты и обсуждение
Findings
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Full Text
Published version (Free)

Talk to us

Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have

Schedule a call