Detecção da infecção pelo vírus da artrite-encefalite caprina: imunodifusão em ágar e reação em cadeia da polimerase com "primers" degenerados

J.K Rutkoski,V Moojen,A.C Wendelstein,D Reischak,R Werenicz,A.P Ravazzolo

doi:10.1590/s0102-09352001000600001

Abstract

O objetivo deste trabalho foi analisar amostras de soro e de células sangüíneas de caprinos para detecção de anticorpos e DNA proviral do vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV), respectivamente. Utilizou-se a técnica de imunodifusão em ágar (AGID) e a reação em cadeia da polimerase (PCR) com "primers" degenerados. Foram analisadas amostras de diferentes procedências: 39 de Mato Grosso do Sul (MS), 19 de São Paulo (SP) e 22 do Ceará (CE), dessas últimas, 12 oriundas de animais importados do Canadá. Os resultados de AGID e PCR foram discordantes, pois o primeiro permitiu a detecção de 25 animais soropositivos, enquanto a PCR detectou DNA proviral de CAEV em 16 amostras. Pela PCR foi possível identificar animais infectados cujos testes sorológicos foram negativos pelo AGID: oito amostras do MS e um do CE. São discutidos diferentes aspectos que poderiam estar envolvidos na discordância dos resultados.

Highlights

O vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV) é um lentivírus pertencente à família Retroviridae
The results obtained by Agar gel immunodiffusion (AGID)
while 16 infected animals were detected by polymerase chain reaction (PCR)

Summary

MATERIAL E MÉTODOS

As amostras de sangue com anticoagulante (heparina) e de soro foram obtidas no Laboratório de Virologia Clínica da Faculdade de Veterinária da UFRGS e junto à Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da UNESP, Botucatu durante o ano de 1998. O total de 80 amostras de caprinos foi encaminhado ao Laboratório de Virologia Clínica da Faculdade de Veterinária da UFRGS para diagnóstico sorológico e PCR para detecção da infecção pelo CAEV. A extração de DNA foi realizada a partir do sangue com anticoagulante obtido de todos os animais testados pelo AGID, utilizando-se DNAzol (GIBCO). A PCR foi realizada conforme descrito anteriormente (A enzima Taq DNA polimerase foi cedida pelo Laboratório CENBIOT Enzimas – Centro de Biotecnologia – UFRGS) (Marchesin et al, 1998), com modificações. Seqüências de nucleotídeos dos “primers” degenerados utilizados na PCR, específicos para o gene gag dos lentivírus de pequenos ruminantes, e sua localização no genoma

RESULTADOS E DISCUSSÃO

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS