Defective expression of TGFBR3 gene and its molecular mechanisms in non-small cell lung cancer cell lines

Abstract

背景与目的国外有研究表明，非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）中转化生长因子受体Ⅲ（TGFBR3）存在缺陷表达，但是分子机制尚未明确。本研究以正常支气管上皮细胞（human bronchial epithelial cell, HBEpiC）为对照，分析NSCLC细胞株中TGFBR3基因的表达情况，并探讨TGFBR3基因表达失活的分子机制。方法采用Western blot检测HBEpiC和NSCLC细胞株中TGFBR3的表达情况并做相对定量分析；采用DNA直接测序检测TGFBR3基因启动子基本转录元件区的突变情况；应用亚硫酸氢钠处理后测序法（bisulfite sequence-PCR, BSP）检测TGFBR3基因启动子区甲基化状态。结果NSCLC细胞株中TGFBR3表达水平明显低于HBEpiC；高转移细胞株95D明显低于非转移细胞株LTEP-α-2、A549、NCI-H460；HBEpiC与NSCLC细胞株中TGFBR3基因近端启动子区-165到-75区域无遗传突变，且未见甲基化，远端启动子区-314到-199区域均为高甲基化。结论TGFBR3基因在NSCLC细胞株中表达下调，在高转移细胞株95D中尤其明显，提示该基因的表达缺陷对NSCLC发生发展起重要作用，可能与NSCLC的侵袭和转移相关；然而，TGFBR3基因启动子区重要转录元件区域的甲基化状态并不是导致TGFBR3基因表达下调的主要原因。