Cyclic RNA Molecule circ_0007766 Promotes the Proliferation of Lung Adenocarcinoma Cells by Up-regulating the Expression of Cyclin D1/CyclinE1/CDK4

Abstract

背景与目的环状RNA（circular RNA, circRNA）是有别于传统线性RNA的一类新型非编码RNA（non-coding RNA, ncRNA），越来越多的研究提示circRNA可作为诸多恶性肿瘤的生物学标志物，并成为治疗的潜在靶标。因此从circRNA角度挖掘肺腺癌新型分子靶标，将有助于揭示肺腺癌发生发展新机制，并为临床诊疗提供新思路。本研究针对前期筛选出的一个肺腺癌组织高表达circRNA即circ_0007766进行体外生物学功能验证和分析，从而对circ_0007766促进肺腺癌增殖的相关机制进行初步探索。方法首先通过qPCR检测考察肺腺癌细胞中circ_0007766的表达水平，然后采用siRNA干扰circ_0007766的表达，通过CCK8法、划痕修复、PI单染和AnnexinV/PI双染方法检测circ_0007766沉默表达对肺腺癌细胞的增殖、周期和凋亡作用的影响。此外，我们还采用qPCR和western blots方法初步研究了circ_0007766在肺腺癌细胞中的生物学作用机制。结果qPCR检测表明肺腺癌细胞株中表达有circ_0007766，在SPCA-1细胞中干扰circ_0007766表达，发现细胞增殖和迁移能力受到了抑制，细胞周期发生了G0/G1期阻滞，而细胞凋亡则不受影响。circ_0007766的缺失并不影响其亲本基因ERBB2的mRNA表达，而对eIF4A3调控的细胞周期相关基因Cyclin D1/Cyclin E1/CDK4的mRNA和蛋白水平均有影响。结论本研究通过体外功能学研究，发现circ_0007766可能对肺腺癌细胞增殖、迁移具有促进的作用，进一步的分子机制研究发现circ_0007766可上调细胞周期关键蛋白Cyclin D1/Cyclin E1/CDK4的表达，进而促进肺腺癌恶性增殖。本研究以circRNA为视角，将对肺腺癌发生发展机理及预后判断提供新线索，为临床治疗应用提供新靶标。