Abstract
RESUMO As espécies de protozoários patogênicos de veiculação hídrica Giardia spp. e Cryptosporidium spp. foram responsáveis por cerca 90% dos surtos de gastroenterite ocorridos nos últimos 25 anos, em vários países. Critérios de avaliação das etapas referentes à detecção destes agentes em amostras de água, tais como: precisão inicial, inoculação nas amostras em água bruta e, diagnóstico e localização de erros estão abordados neste trabalho. Estes critérios devem ser correntemente aplicados e constantemente avaliados pelos laboratórios, a fim de assegurar a confiabilidade dos resultados obtidos durante um monitoramento e, assim, fornecer subsídios para uma avaliação do risco de surtos.
Highlights
A contaminação dos recursos hídricos por protozoários patogênicos de veiculação hídrica tem ocorrido em todo o mundo tornando-se um grande desafio para os sistemas produtores e distribuidores de água
As espécies Giardia spp. e Cryptosporidium spp. foram responsáveis por cerca 90% dos surtos de gastroenterite ocorridos nos últimos 25 anos em países como os Estados Unidos, Canadá e Japão (Karanis et al, 2007)
Uma proposta de estrutura para o controle de qualidade de metodologias de detecção consiste em estabelecer metas de qualidade que vão desde um gerenciamento dos recursos humanos até a manutenção física do laboratório e de seus equipamentos (Fig. 1)
Summary
Por serem realizados com água reagente, os ensaios de precisão inicial atestam a habilidade de execução do método de detecção escolhido, livre de interferências da matriz como, por exemplo, a turbidez da amostra. A precisão inicial é determinada mediante a contaminação artificial de amostras de água reagente (com um número amostral mínimo de 4), com suspensões contendo um número conhecido de oocistos de Cryptosporidium spp. e cistos de Giardia spp., usualmente com variação entre 100 a 500 organismos; estas amostras são processadas empregando o protocolo adotado pelo laboratório baseado nas etapas de filtração, eluição, concentração, purificação, coloração e visualização de protozoários. O inóculo Color Seed® é uma suspensão de oocistos e cistos marcados com corante vermelho fluorescente, ou seja, a sulfo-rodamina, que constitui o corante “Texas Red” (Warnecke et al, 2003), contidos em um frasco de 5 mL, com número aproximado de 100 oocistos e 100 cistos ± 1 DP, também preservados em aproximadamente 1 mL de solução salina, e enumerados por citometria de fluxo, o mesmo desvio padrão do número dos organismos em cada tubo menor que 2,5 e, inativados com uma dose de radiação gama. Fatores como aspectos biológicos (idade e origem dos organismos), procedimentos prévios de limpeza e meio de armazenamento também influenciam nos valores de recuperação (Bukhari et al, 1998; Lindquist et al, 1999)
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