Chitosan Potential as Delivery Agent for S1 Gene from SARS-CoV-2 with pEGFP-N1 as its Vectors

Abstract

Coronavirus Disease-19 (COVID-19) merupakan penyakit yang disebabkan oleh severe acute respiratory syndrome coronavirus-2 (SARS-CoV-2), penyakit ini mulai muncul pada akhir tahun 2019 dan menjadi pandemi hingga saat ini. Vaksinasi dapat berperan penting dalam prevensi penyebaran penyakit, sehingga banyak dilakukan pengembangan vaksin salah satunya ialah vaksin DNA. Sistem penghantaran seperti kitosan dapat meningkatkan efektifitas dari vaksin. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengoptimasi dan mengevaluasi formula pEGFP-N1-S1 dengan sistem penghantaran kitosan sebagai kandidat vaksin DNA. Plasmid dilakukan kloning pada E.coli DH5α dan dilakukan ekstraksi untuk evaluasi selanjutnya dengan enzim restriksi dan sekuensing. Plasmid EGFP-N1-S1 kemudian diformulasikan dengan nanopartikel kitosan dengan rasio massa Plasmid DNA:kitosan sebesar 1:0,1; 1:0,2; 1:0,3; 1:0,4; 1:0,5; 1:0,6 dan 1:0,7. Hasil plasmid yang dilakukan isolasi memiliki konsentrasi 2182,32 ng/L dan kemurnian sebesar 1,911. Hasil restriksi menunjukkan bahwa gen S1 (684 bp) berhasil diinsersi pada plasmid pEGFP-N1 (4813 bp). Rasio massa DNA:kitosan sebesar 1:0,6 merupakan formulasi yang optimal untuk DNA berikatan dengan kitosan secara sempurna.