Abstract
Diversos relatos evidenciam os benefícios de procariotos fixadores de nitrogênio atmosférico no crescimento e na nutrição de muitas espécies vegetais; entretanto, não há, até o momento, nenhum trabalho visando à prospecção desses microrganismos na rizosfera da seringueira (Hevea brasiliensis). Assim, os objetivos deste trabalho foram verificar a ocorrência de bactérias diazotróficas em solos sob plantio de seringueira, assim como em suas raízes, e isolar e caracterizar essas bactérias. Para essa finalidade, coletaram-se amostras de solo e de raízes finas de seringueiras cultivadas no Campus Experimental da Universidade Federal de Lavras (Lavras, MG) para inoculação em meios de cultura semissólidos sem N na forma combinada, de modo a favorecer o crescimento de algumas espécies de bactérias diazotróficas. Foram obtidos 19 isolados nas amostras de solo, e não houve crescimento de bactérias fixadoras de nitrogênio nas culturas com amostras de raízes. A caracterização celular e das colônias desses isolados indicou que 17 deles produzem grande quantidade de exopolissacarídeo elástico, algumas vezes cartilaginoso. Eles são todos Gram-negativos, com formato celular de bastonete, imóveis e com dois glóbulos de poli-β-hidroxibutirato (PBH), um em cada extremidade do bastonete. O sequenciamento do 16S rDNA e sua análise filogenética confirmaram que isolados representativos desse grupo pertencem ao gênero Beijerinckia (B. indica e B. derxii) e que os outros dois isolados Gram-positivos pertencem ao gênero Bacillus. A presença da nitrogenase - a enzima responsável pela fixação biológica do nitrogênio atmosférico (FBN) - foi confirmada por meio da técnica de redução do acetileno. Conclui-se que, no solo sob plantio de seringueira, houve predominância de diazotróficas de vida livre pertencentes ao gênero Beijerinckia (B. indica e B. derxii), não havendo indícios de bactérias endofiticas ou rizosféricas.
Highlights
Desse nutriente, possivelmente devido à FBN (DelúFilho, 1994)
Embora não tenha sido utilizada nenhuma técnica de coloração para se confirmar a natureza desses grânulos, segundo Becking (1984), o material que constitui os corpos lipídicos ou grânulos, posicionados em cada polo da célula de Beijerinckia, é o poli-βhidroxibutirato (PBH), um composto da classe dos polímeros termoplásticos chamados de polihidroxialcanoatos e que podem ser utilizados pelas bactérias como uma reserva celular
Pelas caracterizações morfológicas e molecular dos isolados obtidos, verificou-se predominância de bactérias pertencentes ao gênero Beijerinckia, havendo ainda a presença de dois isolados do gênero Bacillus
Summary
A coleta das amostras de solo e de raízes foi realizada em um plantio de seringueira adulto e não adubado, localizado no setor de Fisiologia Vegetal da UFLA (Lavras-MG). Caracterização das colônias em meio FAM sólido de 19 isolados obtidos de solo sob seringal, de acordo com a forma (For.), elevação (Elev.), borda (Bor.), superfície (Sup.), velocidade de crescimento (V.cresc.), diâmetro (D.), produção de muco (Muco), consistência (Cons.) e detalhes ópticos Pela análise das relações filogenéticas dos isolados sequenciados (Figura 3b), também foram obtidos dois grupos distintos, formados pelo agrupamento de (1) UFLA-102; 109; 99, Beijerinckia derxii e Beijerinckia indica; e (2) UFLA-96, Bacillus vallismortis e Bacillus liquefaciens, demonstrando alta relação com os grupamentos por características culturais. Como a produção de grandes quantidades de exopolissacarídeo (consistindo de uma goma bastante elástica e algumas vezes cartilaginosa) (Quadro 1), o formato celular de bastonete, a coloração Gram negativa e a presença de dois glóbulos de poli-β-hidroxibutirato (PBH), um em cada polo da célula, evidenciaram que 17 dos 19 isolados apresentam elevada similaridade com as bactérias do gênero Beijerinckia. Em (a) e (c), as barras equivalem a 5 μm, e em (b), a 2 μm
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