Abstract

The article presents the study results on the indication and species differentiation of the Babesia genus protozoa in the organism of ticks taken off dogs and cattle. Diagnostic tests were performed using a multiplex PCR test system, being a self-engineering product, which allows to determine the DNA presence of 6 Babesia genus species in any biological samples, namely: B. canis, B. divergens, B. caballi, B. major, B Bigemina, B. bovis, three of them being species-specific, by the bands’ size at the amplification products’ electrophoregrams. The above test system contains 2 direct and 3 reverse primers flanking the DNA fragments of the gene encoding the 18S rRNA of the Babesia genus protozoa.The subject of the study were ticks obtained from 17 dogs of different breeds and sex-age status and 12 units of livestock (cattle). As a result, the babesial DNA was detected in 11 samples, eight of which were differentiated as Babesia canis, two as Babesia bovis and one as Babesia divergens. Based on the results obtained, the animals, whose ticks, taken off them, had babesia detected, one or another strategy was developed for treatment and prophylaxis measures.The approach suggested in the present article permits identifying the possible risks of babesia invasion at the earliest stages of the disease. Presence or absence of the Babesia genus protozoa in the body of sanguivorous ticks permits avoiding treatments rather toxic for the organism, or to carry out preventive therapy long before the babesiosis clinical symptoms’ manifestation. It is vitally important for pregnant females and especially sensitive to babesiosis dog breeds.The prospect of further research is development of the PCR test systems for indicating and differentiating other tick-borne infections and invasions.

Highlights

  • У статті наведено результати досліджень щодо індикації та видової диференціації найпростіших роду Babesia в організмі кліщів, знятих, з собак та великої рогатої худоби

  • У кліщі знятому з якої було виявлено ДНК Babesia canis, така рекомендація не надавалась, оскільки цей збудник не є інвазивним для худоби

  • Розроблена мультиплексна полімеразну ланцюгову реакцію (ПЛР)-тест-система, до складу якої входять 2 прямі та 3 зворотні олігонуклеотидні праймери, що фланкують різні за розміром

Read more

Summary

Матеріалом для досліджень слугували зразки

ДНК, виділені із 21 кліща, знятого із 17 собак та 8 кліщів – з 8 голів великої рогатої худоби. Індикацію та диференціацію бабезій здійснювали за допомогою мультиплексної ПЛР-тест-системи власної розробки (Mokryi et al, 2017). 3'; BSPR: 5'- ACGAATGCCCCCAACCGTT -3') олігонуклеотидних праймери, що фланкують фрагменти гена 18S рРНК найпростіших роду Babesia, а також реагенти для ПЛР виробництва фірми «Fermentas. Taqполімерази (Thermus aquaticus) («Fermentas UAB», Lithuania), 0,5 мкл Продуктами ПЛР виступають фрагменти гена 18S рРНК представників роду Babesia, що мають розміри від 268 до 298 пар нуклеотидів, консервативний для бабезій шести видів (B. canis, B. caballi, B. divergens, B. major, B. bigemina та B. bovis), які є патогенними для собак, коней, худоби та людей, а також фрагменти розмірами 325, 233 та 146 пар нуклеотидів, специфічні для трьох видів бабезій (B. canis, B. bovis, B. divergens) (Mokryi et al, 2017). Виділений із периферійної крові собаки та зразок ДНК B. Як маркер розміру ДНК використовували pUC19/MspI («Fermentas UAB», Lithuania)

Результати та їх обговорення
Бібліографічні посилання

Talk to us

Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have

Schedule a call

Disclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.