انتخاب بهترین محیط باززایی و بررسی تأثیر وراپامیل بر روی پاسخ دفاعی ریزنمونههای تلقیح شده با Agrobacterium tumefaciens در گیاه گوجهفرنگی(Solanum lycopersicum)

Abstract

به منظور بهینه نمودن شرایط کشت بافت گیاه گوجه‌فرنگی (Solanum lycopersicum)، تأثیر13 ترکیب هورمونی مختلف و دو ریزنمونه کوتیلدون و هیپوکوتیل بر روی میزان باززایی سه رقم نیوتون، این‌فینیتی و دافینس، مورد بررسی قرار گرفت. آزمایش به صورت فاکتوریل و بر پایه طرح کاملا تصادفی با سه تکرار انجام شد. بیشترین میزان ساقه‌زایی (9/11 ساقه در هر ریزنمونه) در مورد رقم دافینس بر روی محیط کشت پایه MS حاوی هورمون‌های 1/0=NAA و 68/0=TDZ میلی‌گرم در لیتر و ریزنمونه کوتیلدون، به دست آمد. پاسخ‌های دفاعی گیاه در مقابل عوامل محیطی، یکی از عوامل بازدارنده باززایی ریزنمونه‌ها در کشت بافت گیاهی است. سیگنال‌دهی یون کلسیم یکی از وقایع اولیه و البته مهم‌ترین واقعه در ایجاد پاسخ دفاعی گیاه در مقابل عوامل محیطی از جمله پاتوژن‌هاست، از این رو تأثیر ترکیب دارویی وراپامیل (Verapamil) به عنوان بلوکه‌کننده کانال‌های کلسیمی بر روی پاسخ دفاعی گیاه، در این تحقیق مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظور تلقیح ریزنمونه‌ها با Agrobacterium tumefaciens سویه LBA4404 و بر اساس شرایط بهینه شده کشت بافت، انجام شد. تأثیر وراپامیل در چهار غلظت 0، 50، 100 و 200 میلی‌گرم در لیتر در محیط هم‌کشتی، مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که استفاده از وراپامیل در مقایسه با نمونه شاهد، موجب کاهش پاسخ دفاعی گیاه می­شود. همچنین استفاده از غلظت 50 میلی‌گرم در لیتر وراپامیل موجب افزایش میزان باززایی شد.