Фізіологічний пріон і активність Na+,K+- та Ca2+-АТРаз плазматичної мембрани клітин довгастого мозку щурів різного віку

M V Kushkevych,V V Vlizlo,U V Martyn,

doi:10.15407/ubj85.02.052

Abstract

Based on the results of immunohistochemical analysis of the rat medulla tissue the localization of physiological prion has been established. Specifically, in rats aged one month they are placed in the gray matter near the bodies of neurons and mikrohliocytes and in animals of six and thirty months--in olive kernel core and upward path bodies. Physiological prion is localized along the nerve processes and is absent in the neuron bodies. In the medulla oblongata of animals aged six months its amount is the highest compared to animals of other age. The activity of plasma membrane ATPases in this tissue decreases with age, the content of sodium and calcium ions increases, while that of potassium is almost unchanged.

Highlights

У кінці ХХ століття були відкриті пріони – збудники багатьох нейродегенеративних захворювань, під час розвитку яких відбуваються губкоподібні зміни тканин органів центральної нервової системи [1], що є несумісними з життям
Проте дані про тканинну локалізацію фізіологічного пріона та його вміст в організмі залежно від віку відсутні
PHYSIOLOGICAL PRION AND ACTIVITY OF PLASMA MEMBRANE Na+,K+- AND Ca2+-ATPase IN THE MEDULLA OBLONGATA OF RATS OF DIFFERENT AGES

Summary

Матеріали і методи

Дослідження проводили на самцях лабораторних щурів Rattus norvegicus var. alba, лінії Wistar, яких утримували в стандартних умовах віварію. Для імуногістохімічних досліджень фіксування тканини, промивання, зневоднення та формування парафінових блоків проводили за стандартною методикою [10]. Зразки з однаковою концентрацією протеїну наносили на полівінілдифторидну (PVDF) мембрану (Millipor, США), яку інкубували з моноклональними первинними антитілами (Antibody mAB6Н4; Prionics, Швейцарія) при 4 °С впродовж 12 год, поліклональними вторинними козячими антимишиними антитілами, кон’югованими з лужною фосфатазою (Sigma, Німеччина) при 22 °С впродовж 60 хв. Для визначення активності Na+,K+- та Са2+-АТРази зразки тканини гомогенізували протягом 1–2 хв на гомогенізаторі Omni GLH220 у середовищі сахарози. Активність Na+,K+-АТРази розраховували за різницею між активністю загальної та уабаїннечутливої, яку визначали в середовищі з 1 мМ уабаїну (Sigma, Німеччина). Активність Са2+-АТРази плазматичної мембрани розраховували за різницею між активністю, яку визначали в середовищі 1 мкМ тапсигаргіну (Sigma, Німеччина) за наявності та відсутності Са2+.

Результати та обговорення

Вік щурів