Abstract
Для целей клинических исследований предложен хроматографический способ определения общего малонового диальдегида (МДА) в плазме и слюне после дериватизации с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТВА). Полученные дериваты очищали на картриджах со сверхсшитым полистиролом марки Purosep-270. Разделение на С18 колонках, детекция при 530 нм. Полное хроматографическое разделение за 4 минуты. Стандартизованы и оптимизированы условия приготовления и хранения стандартов, дериватизационного реагента и биологического материала. Предел количественного обнаружения (LOQ) составил 0.05 нг на инъекцию при соотношении сигнал/шум=10. Метод отличается простотой, хорошей воспроизводимостью при соблюдении всех условий и может быть рекомендован для рутинных клинических анализов МДА в плазме и слюне
Highlights
Malondialdehyde (MDA) is a marker of oxidative stress, but its determination in biological fluids is quite a challenge
The main problem is the choice of the method of hydrolysis of plasma and the method of deproteinization, which significantly affects the yield of malonic dialdehyde
The results of the analysis can be used for diagnosis since the concentration of MDA in saliva can be affected by systemic but local diseases of the oral cavity
Summary
Полученные результаты показали, что выход МДА-ТВА после этапа твердофазной очистки составил 80-84% (n=33). Использование процедуры твердофазной очистки позволило компенсировать обусловленный пробоподготовкой эффект разбавления экстрактов биопроб и тем самым повысить чувствительность анализа. В результате отпала необходимость во флюориметрическом детектировании и, как следует из представленных хроматограмм, вполне достаточно детекции в видимом диапазоне при 530 нм. 4. Хроматограммы стандарта 5 нг (4 мкл) (слева) и экстракта плазмы 30 мкл (0.02 см3) (справа) после дериватизации с ТВА. Колонка Luna 150×4.6 мм, С18(2), 5 мкм, детекция при 530 нм, элюент 22% ацетонитрила и 78% 0.025 М фосфатного буферного раствора с рН 7.0, скорость потока 1000 мкл/мин, давление 76 бар. Предел количественного обнаружения (LOQ) составил 0.05 нг на инъекцию при соотношении сигнал/шум=10. Литературные данные и результаты собственных наблюдений, проведенных с помощью разработанного метода, представлены в таблице 2
Sign-in/Register to view highlights & summary 
Published Version (
Free)
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a callDisclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.
