Summary Protozoa from the rumen of fistulated buffaloes were isolated, classified and counted before use for enzyme studies. Glutamine synthetase, glutaminase, and asparaginase were characterized and the effect of NH4+, ATP, Cl− phosphates, pH and substrate concentrations on the activity of these enzymes was determined to study the metabolism of NH4+ by rumen protozoa. The results indicate that NH4+ inhibits the activities of glutaminase (pH 4.9, 6.8) and asparaginase. Inhibition of glutaminase (pH 4.9) by NH4+ is partially reversed by Cl− ions. Glutaminase (pH 4.9) is also inhibited by phosphates. Asparaginase also showed inhibition by NH4+. Glutamine synthetase activity is initially stimulated by NH4+, but higher concentrations of NH4+ are inhibitory. Maximal activity of the enzyme was observed at 6.0 and 2.72 mM conc. of NH4+ and ATP and the rate of enzyme activity was not proportionately increased with increasing concentration of ATP. Zusammenfassung Das Verhalten der Enzyme des Ammoniakstoffwechsels von Pansenprotozoen des Buffels Vor den Versuchen wurden die Protozoen mittels Pansenfistel isoliert, gezahlt und klassifiziert. Zur Abklarung des Ammoniumstoffwechsels der Pansenprotozoen wurde der Einflus folgender Faktoren auf die Aktivitat der Glutaminsynthetase, Glutaminase und Asparaginase untersucht: Ammonium-, Chlorid- und Phosphationen sowie ATP, pH und Substratkonzentrationen. Ergebnisse: NH4+ hemmt die Aktivitat der Glutaminase (pH 4,9; 6,8) und Asparaginase. Die Hemmung der Glutaminase durch NH4+ kann durch Cl−-Ionen bei einem pH von 4,9 partiell in eine Forderung umschlagen. Die Glutaminase (pH 4,9) wird durch Phosphate ebenfalls gehemmt. Auch die Asparaginase wird durch NH4+ gehemmt. Die Aktivitat der Glutaminsynthetase wird durch NH4+ initial stimuliert durch hohere NH4+- und ATP-Konzentrationen von 6,0 bzw. 2,72 mM gehemmt. Die Enzymaktivitat wurde durch eine ATP-Konzentrationserhohung nicht proportional verstarkt. Resume Comportement des enzymes du metabolisme de l'ammoniac des protozoaires de la panse du buffle Les protozoaires isoles grâce a une fistule de la panse ont ete comptes et classes avant les recherches. Pour clarifier le metabolisme de l'ammonium des protozoaires de la panse, on a examine l'influence des facteurs suivants sur l'activite de la synthetase de la glutamine, de la glutaminase et de l'asparaginase: les ions ammonium, chlore et phosphate ainsi que l'ATP, le pH et les concentrations du substrat. Resultats: NH4+ inhibe l'activite de la glutaminase (pH 4,9; 6,8) et de l'asparaginase. On peut provoquer partiellement une acceleration du bloquage de la glutaminase par NH4+ avec des ions chlore a un pH de 4,9. La glutaminase (pH 4,9) est egalement inhibee par des phosphates. L'activite de la glutamine-synthetase est initialement stimulee par NH4+ avec une concentration plus elevee NH4+ et d'ATP de 6,0 et respectivement 2,72 mM. L'activite enzymatique n'a pas ete renforcee proportionnellemment par une elevation de la concentration de l'ATP. Resumen El porte de las enzimas del metabolismo amoniacal de los protozoos ruminales en el bufalo Antes de efectuar los ensayos, se aislaron los protozoos mediante fistula ruminal, se contaron y clasificaron. Para dilucidar el metabolismo del amonio en los protozoos ruminales, se examino el influjo que ejercen los factores siguientes sobre la sintesis de la glutamina, glutaminasa y asparraginasa: iones amonio, cloruro y fosfato, asi como ATF, pH y concentraciones de substrato. Resultados: NH4+ inhibe la actividad de la glutaminasa (pH 4,9; 6,8) y asparraginasa. La inhibicion de la glutaminasa por NH4+ puede cambiar repentinamente en parte hacia una promocion mediante la actuacion de iones Cl en un pH de 4,9. La glutaminasa (pH 4,9) es inhibida tambien por los fosfatos. Asimismo es inhibida la asparraginasa por NH4+. La actividad de la sintetasa de la glutamina es estimulada inicialmente por NH4+, siendo inhibida por concentraciones grandes de NH4+ y ATP de 6,0 resp. 2,72 mMol. La actividad enzimatica no fue reforzada proporcionalmente con el aumento de la concentracion de la ATF.