ZAP-70: aspectos práticos

Abstract

A ZAP-70 e uma proteina kinase normalmente expressa nos linfocitos T e celulas NK, mas ausente nos linfocitos B. No entanto, ela esta expressa nas celulas B de pacientes com LLC que nao apresentam mutacao nos genes da regiao variavel da cadeia pesada de imunoglobulina (genes IgVH). Alem disso, observa-se que a expressao da ZAP-70 e estavel nestes pacientes ao longo do tempo, diferentemente da expressao de CD38, outro marcador considerado de prognostico nesta doenca. Estudos tem sido realizados para valida-la como marcador surrogate para o estado de mutacao dos genes IgVH (um forte fator de prognostico), uma vez que a sua avaliacao molecular e laboriosa e demorada. O metodo mais rapido e simples para avaliar a expressao da ZAP-70 e atraves da citometria de fluxo utilizando-se anticorpos monoclonais ja disponiveis no mercado. O primeiro produto comercial (clone 2F3.2 da marca Upstate) e puro, nao conjugado com fluorocromos, o que torna o ensaio laborioso, apesar de resultados consistentes. Rapidamente surgiram outros Ac conjugados com fluorocromos (com FITC da propria Upstate, ou Alexa-fluor, FITC ou PE da Caltag) e estudos estao sendo realizados para a sua validacao tecnica.