Abstract
The study was devoted to identifying the relation between vitamin D3 availability (assessed by the level of circulatory 25OHD3), content of vitamin D3 25-hydroxylase isozymes CYP27A1 and CYP2R1 in hepatic tissue and functional activity of peripheral blood phagocytes in mice with experimental type 1 diabetes. It has been shown that diabetes is accompanied by the development of vitamin D3-deficiency which is characterized by decreased 25OHD3 content in blood serum and determined by changes in tissue expression of the major isoforms of vitamin D3 25-hydroxylase. The level of hepatic CYP27A1 was revealed to be markedly reduced with a concurrent significant augmentation of CYP2R1. Cholecalciferol administration resulted in normalization of tissue levels of both isoforms of vitamin D3 25-hydroxylase and blood serum 25OHD3 content. Diabetes-associated vitamin D3 deficiency correlated with a decrease in phagocytic activity of granulocytes and monocytes, and their ability to produce antibacterial biooxidants such as reactive oxygen and nitrogen forms. Vitamin D3 efficacy to attenuate these abnormalities of immune function was established, indicating an important immunoregulatory role of cholecalciferol in the phagocytic mechanism of antigens elimination implemented by granulocytes and monocytes.
Highlights
Матеріали і методиДослідження проводили на самцях мишей лінії C56Bl/J6 масою 21 ±3 г
Ц укровий діабет (ЦД) – ендокриннообмінне захворювання, яке характеризується генетично детермінованим абсолютним або відносним дефіцитом інсуліну – гормону підшлункової залози, хронічною гіперглікемією та порушенням переважної більшості ланок обміну речовин [1]
The study was devoted to identifying the relation between vitamin D3 availability, content of vitamin D3 25-hydroxylase isozymes CYP27A1 and CYP2R1 in hepatic tissue and functional activity of peripheral blood phagocytes in mice with experimental type 1 diabetes
Summary
Дослідження проводили на самцях мишей лінії C56Bl/J6 масою 21 ±3 г. Забезпеченість організму мишей вітаміном D3 оцінювали за рівнем 25ОНD3 в сироватці крові, який визначали імуноензимним методом Електрофоретично розділені протеїни (50–100 мкг/лунку) у поліакриламідному гелі в буферній системі Леммлі переносили на нітроцелюлозну мембрану (Sigma, США) протягом 1 год при 350 мA у буфері, що містив: 25 мМ трис, 192 мМ гліцин, рН 8,3; 0,1% DSNa, 20% метанолу. Мембрану інкубували ніч при 4 °С з поліклональними антиCYP2R1 (1 : 200), антиCYP27A1 (1 : 200) антитілами (Santa Cruz Biotechnology, США) та протягом 1 год при кімнатній температурі із вторинними антитілами, кон’югованими з пероксидазою хрону (1 : 5000) (Santa Cruz Biotechnology). Для контролю вмісту протеїнів у пробах, мембрану інкубували з моноклональними антиβ-актин антитілами (1 : 10 000) (Sigma, США). Імунореактивні сигнали на мембрані виявляли за допомогою інкубації мембрани з реактивами для посиленої хемілюмінесценції (Sigma, США). Статистичну значимість різниці середніх показників оцінювали, використовуючи стандартний t-критерій Стьюдента для некорельованих вибірок
Sign-in/Register to view highlights & summary Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a callDisclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.
