Abstract
Zymographic analysis showed that all subcellular fractions of the serogroups possessed different degree of lipolytical activity. Maximal hydrolysis in the radial enzyme-diffusion reaction in agarose gel was observed in Tween-20, Tween-80, Triton �-305 and Triton �- 405. Total hydrolase activity of urea extracts in Tween-20, Tween-80, Triton �- 405, Span-85 excelled those in the preparations of outer membranes. Maximal lipolytical activity in regard to the Tweens was shown by the preparations of urea extracts prepared from the nontoxigenic strains of O1 serogroups, while in relation to the Tritons � preparations of urea extracts from the toxigenic strains (p < 0,05).
Highlights
Zymographic analysis showed that all subcellular fractions of the serogroups possessed different degree of lipolytical activity
Maximal lipolytical activity in regard to the Tweens was shown by the preparations of urea extracts prepared from the nontoxigenic strains of O1 serogroups, while in relation to the Tritons – preparations of urea extracts from the toxigenic strains (p < 0,05)
Урбанович Людмила Яковлевна – доктор медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории холеры ФКУЗ «Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора» Urbanovich Ljudmila Yakovlevna – Doctor of Medical Sciences, Senior Research Officer of the Laboratory of Cholera of Irkutsk Antiplague Research Institute of Siberia and Far East of Rospotrebnadzor
Summary
В работе использованы штаммы V. cholerae О1 и О139 серогрупп разной эпидемической значимости, выделенные в неблагополучные (токсигенные штаммы от больных и объектов окружающей среды) и благополучный Штаммы холерного вибриона выращивали на казеин-дрожжевом агаре (pH 7,6) при 37 °С в течение суток и смывали физиологическим раствором. После суточной экспозиции при комнатной температуре проводили бактериологический контроль стерильности лизата в соответствии с «Инструкцией по контролю специфической стерильности экспериментальных препаратов, приготовленных из культур чумного или холерного микробов» (Саратов, 1982). Наличие и состав липолитических ферментов в субклеточных фракциях выявляли методом субстратной зимографии после электрофореза препаратов в 8 %-м и 13 %-м блоках полиакриламидного геля (ПААГ) без термообработки образцов в присутствии ДСН. Далее ПААГ после отмывки от избытка ДСН накладывали на поверхность пластины 1 %-го агарозного геля толщиной 0,3 мм на стеклянной подложке (16 × 16 см), приготовленного на 0,05 М Tрис-HCl буфере (pH 8,3) и содержащего 0,0125 %-й раствор CaCl2 и 0,5 %-й раствор неионного детергента в качестве субстрата. Статистическую обработку проводили общепринятыми методами, рассчитывая среднеарифметические величины и их средние ошибки
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
More From: Byulleten-Vostochno-Sibirskogo-nauchnogo-tsentra-Sibirskogo-otdeleniya-Rossiyskoy-Akademii-meditsinskih-nauk
Disclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.