Vancomycin-based Lowenstein-Jensen selective medium for reducing contamination of mycobacterial cultures by spore-forming bacteria

Abstract

Introductionle diagnostic de la tuberculose par culture sur milieu solide demeure la méthode de référence malgré le développement de nouvelles méthodes. Cependant, les performances de cette méthode sont entravées par des taux élevés de contamination des cultures dues à des bactéries sporulantes. Ces bactéries sont en général sensibles à la vancomycine et par conséquent à l´association vancomycine, colistine, nystatine et triméthoprime (VCNT). L´objectif de notre étude était donc d´évaluer l´efficacité d´un milieu de culture sélectif de Lowenstein-Jensen (LJ) à base de VCNT pour réduire les contaminations de culture.Méthodesdes expectorations collectées chez 120 patients tuberculeux et non tuberculeux inclus entre Octobre 2016 et Mai 2017 ont été décontaminées par la méthode modifiée de Petroff. Les culots de décontamination ont été inoculés sur les milieux LJ ordinaires (LJ-MO) et sélectif LJ-VCNT à 10µg/ml de vancomycine. Quinze souches de bactéries sporulantes ont été inoculées sur les mêmes types de milieux afin d´évaluer leur susceptibilité au VNCT.Résultatsles contaminations des cultures sur le milieu LJ-VCNT à 10µg/ml de vancomycine et sur milieu LJ-MO étaient respectivement de 11,66% (14/120) et de 39,16% (47/120) avec p<0.0001. La susceptibilité des bactéries sporulantes au VCNT diminuait avec l´augmentation de la durée d´incubation des cultures.Conclusionle milieu sélectif de L-J VNCT à 10µg/ml de vancomycine a permis une réduction significative du taux de contamination des cultures. Ce milieu pourrait contribuer à l´amélioration de la qualité des cultures des mycobactéries et donc du diagnostic bactériologique de la tuberculose.