Tipagem e estado físico de papilomavírus humano por hibridização in situ em lesões intra-epiteliais do colo uterino

Lúcia Buchalla Bagarelli,Antonio Hélio Oliani

doi:10.1590/s0100-72032004000100009

Abstract

OBJETIVO: realizar estudo molecular (hibridização in situ) de pacientes com lesões intra-epiteliais do colo uterino, visando investigar a freqüência e o estado físico do papilomavírus humano (HPV). MÉTODOS: cortes histológicos de biopsias do colo uterino de 84 pacientes foram avaliados pela hibridização in situ, com sonda de amplo espectro, que permite identificação dos HPVs dos tipos 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 42, 45 e 56, e com sondas específicas para HPV dos tipos 6, 11, 16, 18, 31 e 33. Os padrões físicos de marcação do DNA dos HPV encontrados foram: epissomal, quando todo o núcleo ficou corado pela biotina (marrom); integrado, onde se visualizaram um ou dois pontos marrons no núcleo hibridizado, ou misto, com a associação dos dois padrões anteriores. Das 84 pacientes avaliadas, 31 (36,9%) tinham lesões intra-epiteliais de baixo grau (LIE-BG) e 53 (63,1%) tinham lesões intra-epiteliais de alto grau (LIE-AG) ao exame histológico. Para a análise estatística foi empregado o teste exato de Fisher. RESULTADOS: do total dos casos, 46 (54,7%) foram positivos para DNA de HPV pela sonda de amplo espectro. Na tipagem dos vírus, o HPV-16 foi mais freqüente nas LIE-AG, com 12 casos - 22,6% (p<0,05). As freqüências dos outros tipos de HPV não foram diferentes entre os casos com LIE-BG e LIE-AG. Na avaliação do estado físico do DNA de HPV, os percentuais de padrões epissomais (mais comum nas LIE-BG) e integrados não foram diferentes entre os dois grupos. Houve predomínio do tipo misto nas LIE-AG em relação às LIE-BG: 26,4% e 3,2%, respectivamente (p<0,01). O estado físico do DNA do HPV, integrado ao da célula hospedeira, foi mais freqüente nos casos mais graves. CONCLUSÕES: o HPV-16 foi o mais freqüente nas LIE-AG. As freqüências dos outros tipos de HPV não foram diferentes quando se compararam os casos com LIE-BG e LIE-AG. O estado físico do DNA do HPV, integrado ao da célula hospedeira, foi mais freqüente nos casos mais graves.

Highlights

Methods: histological sections of biopsies of the uterine cervix from 84 patients were evaluated by in situ hybridization, with a broad-spectrum probe, which allows the identification of the human papillomavirus (HPV) types 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 42, 45, and 56 and with specific probes for HPV types 6, 11, 16, 18, 31, and 33
By physical condition assessment of the HPV DNA, the percentage of the episomal and integrated patterns showed no significant differences between the two groups; the mixed high-grade squamous intraepithelial lesions (HSIL) type prevailed when compared to low-grade squamous intraepithelial lesions (LSIL): 26.4 and 3.2%, respectively (p
Deverá ser substituído por outro mais sensível

Summary

Trabalhos Originais

Objetivo: realizar estudo molecular (hibridização in situ) de pacientes com lesões intraepiteliais do colo uterino, visando investigar a freqüência e o estado físico do papilomavírus humano (HPV). Os HPVs de médio risco (31, 33, 35, 39, 51, 52, 58 e 61) são mais encontrados em lesões intra-epiteliais de alto grau (LIE-AG) e, com menor freqüência, em cânceres. Métodos mais recentes de amplificação dos sinais de detecção utilizando a deposição de catalisador nos sítios de hibridização com deposição de tiramida biotinilada no tecido[7,8] aumentaram a sensibilidade da HIS, sendo possível detectar até uma única cópia viral por célula e permitindo a avaliação do estado físico (epissomal ou integrado ao genoma do hospedeiro) do HPV. Em vista da importante participação do HPV na carcinogênese cervical, propusemo-nos a realizar estudo por HIS de lesões intra-epiteliais do colo uterino, com o objetivo de avaliar a freqüência, tipos mais freqüentes e o estado físico do DNA do HPV em pacientes atendidas em nosso serviço

Pacientes e Métodos

Positivo Negativo Total

Padrão físico Do DNA de HPV

Findings

Bagarelli et al A