Abstract

Aim. To study the immunobiological activity of the complex preparation for Haemophilus influenzae infections prevention. Materials and methods. We used the complex preparation, containing 1 mcg of lipooligosaccharide and 10 mcg of protein-containing fraction, lipooligosaccharide and protein-containing fraction monopreparations, and capsular polysaccharide preparation. For studying cross-protective activity of the complex preparation white outbread mouses (weight 14-16 g) were intramuscularly immunized with a dose 0,5 ml. 10 days later the animals were inoculated with H. influenzae encapsulated and non-typed strains culture inoculum in a dose 5*109 microbial cells/mouse. The immunized animals specific antibodies level was determined by means of indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). For studying complex preparation’s influence on the development of the infectious process immunized mouses were intranasally inoculated with H. influenzae encapsulated and non-encapsulated strains. The mouses dissections were performed in 3, 24 and 72 hours after inoculation. Sterile samples (lung tissue) were homogenized, titrated and plated onto 5% horse blood agar; then after 18-20 growth hours we counted the number of colonies and recalculated its number for one mouse. Results. Our investigations have shown that the complex preparation provided 90-100% animals’ defence from used in this experiment infectious agent strains. Mouses immunization with the preparation induced significant increase in the level of antibodies, revealed by means of indirect ELISA. Beginning with the third day after intranasal inoculation there was a pathogen multiplica112 tion in control group mouses lungs. In the same time immunized mouses had almost indetectable number of bacteria. Almost all animals from control group contained pathogen in lymph nodes and mesentery; though pathogen’s presence in immune mouses viscera was rather occasional. Conclusion. The complex preparation protected animals from all H. influenzae strains, used in our experiment. The dynamic of the infectious process directly depended on the development of immune response on the complex preparation injection.

Highlights

  • МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫВ работе использованы комплексный препарат, содержащий 1 мкг липоолигосахарида (ЛОС) и 10 мкг белоксодержащей фракции (БСФ), а также монопрепараты ЛОС, БСФ и препарат капсульного полисахарида (КПС).

  • Препарат ЛОС получали экстракцией раствором хлорида натрия [1].

  • Белоксодержащую фракцию получали методом водной экстракции (БСФ-ВЭ) [3].

Read more

Summary

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В работе использованы комплексный препарат, содержащий 1 мкг липоолигосахарида (ЛОС) и 10 мкг белоксодержащей фракции (БСФ), а также монопрепараты ЛОС, БСФ и препарат капсульного полисахарида (КПС). Препарат ЛОС получали экстракцией раствором хлорида натрия [1]. Белоксодержащую фракцию получали методом водной экстракции (БСФ-ВЭ) [3]. Капсульный полисахарид H.influenzae получали из культуральной жидкости экстракцией цетавлоном. Все препараты получены из микробных культур штаммов-продуцентов H.influenzae в лаборатории иммунохимической диагностики НИИВС им. Для изучения протективной активности комплексного препарата аутбредным мышам массой 14-16 г вводили однократно внутримышечно 0,5 мл (доза) препарата. Через 10 дней животных заражали живыми культурами H.influenzae капсульного (No1095) и бескапсульных штаммов (No45, No58, No65) в дозе 5×109 микр.кл./мышь. В качестве отрицательного контроля использовали сыворотки интактных животных. Для изучения влияния комплексного препарата на развитие инфекционного процесса иммунизированных мышей интраназально заражали культурами капсульного и бескапсульного штаммов H.influenzae [6]. Вскрытие животных проводили через 3, 24, 48 и 72 часа. Стерильно отобранный материал (ткань легкого) гомогенизировали, титровали и мерно высевали на чашки Петри с сердечно-мозговым агаром с добавлением 5% крови и через 18-20 часов культивирования в термостате при температуре 36,5 °С и 5% СО2 производили подсчет выросших колоний бактерий, после чего пересчитывали число бактерий на мышь

РЕЗУЛ ЬТАТ ЫОБСУЖДЕНИЕ
КПС Hib
Full Text
Published version (Free)

Talk to us

Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have

Schedule a call