The establishment and application of internal quality control system for real-time quantitative PCR detection of BCR-ABL (P210) transcript levels

Abstract

目的制备BCR-ABL (P210）实时定量PCR（RQ-PCR）检测的室内质控物，建立RQ-PCR检测BCR-ABL (P210）转录本水平的室内质控方法。方法取K562细胞和HL-60细胞，制备RQ-PCR检测BCR-ABL（P210）转录本水平的高、低浓度质控物，2013年8月至2015年10月用RQ-PCR法与临床标本同步检测BCR-ABL（P210）184次，按试剂批号（批号20130303、20131212、20140411和20150327分别简称为R1、R2、R3、R4）统计分析标准曲线斜率、截距及相关系数，并按试剂批号和质控物批号（批号20130725、20140611分别简称为Q1、Q2）统计分析高、低浓度质控物检测结果，对斜率、截距及质控物检测结果采取Levey-Jennings质控图结合Westgard多规则质控方法进行质控判断。结果①标准曲线斜率、截距：R1检测53次，斜率、截距均未失控；R2检测37次，斜率失控6次，且第2~8次在x−s限值下侧，第12~37次在x值上侧，截距失控9次，且第1~8次在x+s限值上侧，第12~37次出现在x值下侧；R3检测80次和R4检测14次，斜率、截距均未失控。②质控物结果：Q1批号质控物，R1检测49次未失控，R2检测23次失控1次；Q2批号质控物，R2检测14次、R3检测72次及R4检测14次均未失控。结论利用K562细胞和HL-60细胞制备定量检测BCR-ABL（P210）转录本水平的高、低浓度室内质控物，制备方便，检测结果可靠、稳定，使用质控物检测结果结合标准曲线斜率、截距进行室内质控，可更有效地保证临床检测结果的准确性和稳定性。