Targeted suppression of miRNA-21 inhibit K562 cells growth through PTEN-PI3K/AKT signaling pathway

Abstract

目的研究靶向抑制miRNA-21表达对K562细胞生物学功能的影响，观察其对PTEN-PI3K/AKT通路相关分子表达水平的影响，探讨其在白血病发病机制中的作用。方法将化学合成的miRNA-21抑制物电转染K562细胞，RT-PCR检测K562细胞miRNA-21表达变化，MTT法检测miRNA-21对K562细胞活力影响，流式细胞术分析miRNA-21对K562细胞凋亡的影响，应用Western blot技术检测K562细胞中PTEN、PI3K及p-AKT蛋白表达水平。结果转染24 h实验组miRNA-21 mRNA相对表达水平为（8.070±5.138）%，低于各对照组（P <0.05）。转染24 h实验组K562细胞凋亡率为（13.370±0.250）%，高于各对照组（P<0.01）。实验组K562细胞的增殖抑制率由转染后24 h的（8.1± 0.9）％升至60 h的（43.1±2.1）%。成功抑制miRNA-21表达后，与对照组相比，K562细胞凋亡增加（P< 0.01），细胞中PTEN蛋白表达上调（P<0.01），PI3K及p-AKT蛋白表达下调（P<0.01）。结论靶向抑制K562细胞miRNA-21可以上调PTEN表达而抑制PI3K/AKT信号通路，发挥其抑制K562细胞增殖及促进凋亡作用。