Abstract

Vero cells used by distinct measles vaccine control laboratories had their susceptibility to Moraten, Schwarz and Biken CAM-70 vaccine strains assayed. Of a total of 72 lots of measles vaccine whose potency was titrated by microtechnique in two Vero cell samples (Vero IB and Vero INCQS), 25 had been produced with Moraten strain, 24 with Schwarz and 23 with Biken CAM-70. The statistical analysis of the results demonstrated that both Vero cells assayed presented comparable susceptibility to Moraten and Biken CAM-70 strains. As to the Schwarz strain, Vero IB cells were more susceptible than the other cell sample tested, thus confirming the existence of different sensitivities of Vero cells to some measles vaccine strains, or even to viruses derived from the same strain but with different passage histories. An altered cell susceptibility to virus replication may significantly alter the results in potency testing. Such alteration may be caused not only by the adoption of distinct protocols for the maintenance of cell cultures by different control laboratories but also by the methodology followed in the vaccine titration. In order to minimize the differences existing among the results obtained in the potency testing, it is suggested that all control laboratories should use the same protocols for cell culture maintenance as well as for vaccine potency testing.

Highlights

  • O teste de potência da vacina contra o sarampo tem por objetivo constatar se o vírus nela contido está presente em concentração capaz de ativar os mecanismos imunitários do indivíduo vacinado, de modo que anticorpos específicos possam posteriormente protegêlo de uma infecção natural pelo vírusdo sarampo

  • Vírus sarampo-padrão - Cepa Schwarz - A constância da potência relativa do vírus foi monitorada em todos os testes, através da inclusão de um vírus sarampo-padrão, lote-trabalho, produzido no Serviço de Culturas Celulares do Instituto Butantan11

  • Como a simples análise dos resultados apresentados na Tabela poderia sugerir maior sensibilidade das células Vero INCQS à cepa Moraten, ou das células Vero IB com relação às cepas Schwarz e Biken C AM70, esses dados foram submetidos a testes estatísticos, a fim de verificar se as diferenças observadas entre os títulos obtidos eram ou não significantes

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Summary

Material e Método

Células de linhagem Vero - Células Vero, originalmente obtidas do ATCC (American Type Culture Collection) e provenientes de dois centros controladores de qualidade de vacina contra o sarampo foram usadas nas titulações de potência: a) Vero IB* utilizada nas passagens 200 a 250 e mantida em Eagle MEM modificado (Eagle/1) acrescido de 10% de soro de vitela; b) Vero INCQS** utilizada nas passagens 49 a 84 e mantida em Eagle MEM (Flow Laboratories, C AT 10.101) (Eagle/2) suplementado com 5% de soro fetal bovino. Vero IB foi de 3xl células/ml em Eagle/1 + 2% de soro de vitela, enquanto que a concentração das células Vero INCQS foi de 2,5x105 células/ml, em Eagle/ 2 + 5% de soro fetal bovino. Teste depotência - Foi realizado por microtitulação, de acordo com o protocolo seguido pelos dois centros de controle dos quais provieram as duas amostras de células Vero. De cada lote de vacina foi feito um pool de dois frascos do qual foi retirada uma alíquota que foi diluída ao décimo, em paralelo, em meios Eagle/1 e Eagle/2, e em duplicata. Vírus sarampo-padrão - Cepa Schwarz - A constância da potência relativa do vírus foi monitorada em todos os testes, através da inclusão de um vírus sarampo-padrão, lote-trabalho, produzido no Serviço de Culturas Celulares do Instituto Butantan. Análise estatística - A análise estatística foi feita através da comparação de médias de dados pareados com os testes Limites para uma Média (determinação de intervalosde confiança para amedianapopulacional) e "t" de Student, utilizando-seo nível designificância de 5% para ambos os testes

Resultados e Discussão
Referências Bibliográficas
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