Study on the immune functions of dendritic cells regulated by histone deacetylase inhibitor Belinostat

Abstract

目的探讨组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂Belinostat对小鼠骨髓来源树突状细胞（DC）免疫功能的影响及初步机制。方法体外诱导培养C57BL/6小鼠骨髓来源的DC，诱导培养第5天为未成熟DC（imDC）组，设0、50、100 nmol/L Belinostat作用组；imDC以脂多糖作用24 h为成熟DC（mDC），设0、50、100 nmol/L Belinostat作用组。从细胞形态、超微结构、免疫表型进行鉴定。流式细胞术检测各组DC免疫表型及趋化因子受体CCR7表达水平，趋化实验检测DC的体外迁移率。单向混合淋巴细胞培养法检测各组DC刺激下异基因淋巴细胞增殖率。ELISA法检测各组DC培养上清中TNF-α、IL-12及IL-10的表达水平。RQ-PCR检测Belinostat对DC中RelB mRNA表达水平的影响。结果成功诱导培养出imDC及mDC并鉴定。50和100 nmol/L Belinostat+imDC组CCR7表达水平均低于imDC组[（25.82±7.25）%对（50.44±5.61）%、（18.71±2.00）%对（50.44±5.61）%]；50 nmol/L Belinostat+mDC组CCR7表达水平高于mDC组[（71.14±1.96）%对（64.90±1.47）%]。Belinostat作用下imDC和mDC的迁移率均下降，但在imDC中组间比较差异无统计学意义。当刺激细胞∶反应细胞比例为1∶2时，100 nmol/L Belinostat+imDC刺激下淋巴细胞增殖率低于imDC组[（227.09±13.49）%对（309.49±53.69）%]。Belinostat作用下mDC所分泌的TNF-α、IL-12和IL-10较mDC组均明显下降，差异均有统计学意义（P值均<0.01）。Belinostat+imDC及Belinostat+mDC中RelB mRNA表达水平较imDC组及mDC组均有降低（P值均<0.05）。结论Belinostat可调节DC迁移、抑制T淋巴细胞增殖及细胞因子分泌，一定程度上抑制DC成熟，可能与其下调DC中NF-κB的转录因子RelB mRNA水平有关。