Abstract
Protein p27/p25 is a product of HIV nef gene and is a multifunctional factor of HIV pathogenicity. Antigenic properties of recombinant NEF polypeptide which includes N-terminal fragment of HIV-1 p27 protein fused to E. coli ß-galactosidase were studied by serological and virological methods. The interaction was shown between recombinant NEF antigen and serums of HIV-positive individuals by ELISA, Western blot and line immunoassay. There was no interaction with sera of healthy individuals. The antigen specificity of recombinant antigen was shown in the reactions with commercial HIV-1 p27/p25 protein analog and with polyclonal antibodies to synthetic peptides corresponding to N-, C-terminal regions of HIV-1 p27/p25 protein. The interaction between IgG of rabbits immunized with recombinant NEF antigen and viral antigens was shown by indirect immunofluorescence and neutralizing assays. Thus it was proven the possibility of using recombinant NEF protein as an antigen for diagnostic and experimental purposes.
Highlights
Анализируемые образцы сывороток крови человека в разведении 1:50 в Трис-солевом буфере с добавлением лизата бактерий E. coli инкубировали с иммуносорбентом в течение 2 часов при комнатной температуре
Chen Y.M., Lin R.H., Lee C.M., Fu C.Y., Chen S.C., Syu W.J. Decreasing levels of anti-Nef antibody correlate with increasing Human immunodeficiency virus (HIV) type 1 viral loads and AIDS disease progression
Summary
Связывание антител с рекомбинантным белком выявляли с помощью конъюгированных с пероксидазой хрена моноклональных антител к IgG человека Перед внесением в лунки планшета с иммобилизованным рекомбинантным белком NEF- ProSpec-Tany (Prospec-Tany TechnoGene Ltd Inc) или β-галактозидазой E. coli, антитела иммунизированных синтетическими пептидами коз разводили в 100 раз в растворе, содержащем рекомбинантный полипептид NEF в разведениях от 1:10–1 до 1:10-5, затем по 100 мкл полученных разведений сывороток вносили в лунки планшета с иммуносорбентом и инкубировали при +37 °С в течение 1 часа. Анализируемые образцы сывороток крови человека в разведении 1:50 в Трис-солевом буфере с добавлением лизата бактерий E. coli инкубировали с иммуносорбентом в течение 2 часов при комнатной температуре. Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью программ «OriginPro 8», «Exсel»
Sign-in/Register to view highlights & summary Sign-in/Register to access full text options 
Free) 
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a call
