Sodium butyrate inhibits the proliferation of human pterygium fibroblasts

Abstract

目的 探讨丁酸钠(sodium butyrate,NaB)对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(human pterygium fibroblasts,HPFs)的抗增殖作用.方法 翼状胬肉成纤维细胞原代、传代培养,取3～5代细胞进行实验.分别加入1.25、2.5、5.0和10.0mmol/L的NaB溶液各作用12、24、48、72 h,同时以DMEM培养液为对照,以噻唑蓝比色法(MTT)在酶标仪上检测吸光度,计算出各时间段各浓度NaB对HPFs的增殖抑制影响;分别加入0、1.25、2.5、5.0和10.0mmol/L的NaB溶液作用48 h,用细胞凋亡检测试剂盒(POD)检测凋亡细胞;流式细胞仪检测NaB对HPFs细胞周期及细胞凋亡的影响.结果 MTT结果显示,NaB为1.25mmol/L组各时间段对HPFs的增殖无明显抑制作用(P＞0.05).NaB≥2.5mmol/L作用12 h后开始抑制HPFs生长(P＜0.05).10.0mmol/L组抑制率可达41.35%,随着时间的延长,各浓度组的抑制作用明显增强,至72 h,各组的抑制率分别为31.67%、47.96%、63.20%;POD法检测显示,经不同浓度NaB作用48 h后HPFs产生凋亡形态学变化,对照组及1.25mmol/L实验组未见明显凋亡细胞;2.5mmol/L组可以观察到少量凋亡细胞,5mmol/L组可见明显凋亡细胞,10mmol/L可见凋亡细胞及少量坏死细胞;流式细胞仪检测发现,HPFs经1.25、2.5、5.0和10.0mmol/L的NaB处理48 h后,G0/G1期细胞群比例增加,S期细胞群比例明显减少,2.5、5.0、10.0mmol/L NaB的DNA直方图G0/G1峰前出现了较明显的亚二倍体峰,计算得凋亡率分别为6.97%、8.58%及12.38%(P＜0.05).结论 NaB≥2.5mmol/L时能有效抑制HPFs的增殖。