SIRT1 Influences the Sensitivity of A549 Non-small Cell Lung Cancer Cell Line to Cisplatin via Modulating the Noxa Expression

Abstract

背景与目的非小细胞肺癌的顺铂耐药是常见的临床现象，严重制约了患者的化疗效果，是亟待解决的问题。SIRT1和Noxa的表达变化影响肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。本研究旨在研究SIRT1表达对非小细胞肺癌对顺铂的敏感性的影响，并探讨其涉及Noxa表达的机制，以求为提高非小细胞肺癌细胞对顺铂敏感性提供希望。方法利用实时荧光定量PCR和Western blot分析A549细胞及顺铂耐药的A549/DDP细胞SIRT1及Noxa mRNA和蛋白水平的表达差异。利用siRNA干扰技术抑制A549/DDP细胞的SIRT1表达，进而使用Cell Titer Blue试验、流式细胞术从细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡方面分析SIRT1沉默对A549/DPP细胞顺铂敏感性的影响。同时利用实时荧光定量PCR和Western blot分析SIRT1抑制对A549/DPP细胞Noxa表达的影响。结果A549细胞和A549/DDP细胞对顺铂的敏感性有显著差异，与A549细胞相比，A549/DDP细胞的SIRT1表达较高，但Noxa表达较低。使用siRNA抑制A549/DPP细胞的SIRT1表达后，与未抑制SIRT1细胞相比，4 μg/mL顺铂处理后的细胞存活率降低，G2期/M期阻滞比例增加，凋亡率提高。同时，SIRT1沉默导致A549/DPP细胞的Noxa表达增加。结论较高的SIRT1可能引起A549细胞对顺铂的耐药性，抑制SIRT1可以提高A549/DDP细胞对顺铂的敏感性，其机制可能涉及SIRT1对Noxa的调节。