Simple HPLC-UV method for the quantification of bupivacaine in human plasma with one step protein precipitation

Abstract

This research paper revolves around the process of the quantification of bupivacaine in human plasma through the selection of a sensitive high performance liquid chromatography method. The extraction of bupivacaine and ropivacaïne as an internal standard from plasma was performed through the use of hexane along with iso-propylalcohol. After liquid-liquid extraction we moved straightforward to the process of the mobile phase in which we had a combination of acetonitrile and potassium dihydrogen phosphate (65:35, v/v). The separation was carried out on a reversed phase C 18 column with UV-detector at 210 nm for bupivacaine and 230 nm for the internal standard. This particular examination exhibited excellent linearity ( r 2 = 0.999) in peak response over the concentration range of 0.1–1.5 μg/mL bupivacaine in human plasma. The mean absolute recoveries for 0.5 and 1.5 μg/mL of bupivacaine in plasma using the present extraction procedure were 97.43% and 95.03%, respectively. The intra- and inter-day coefficients of variation in the plasma were less than 12% at the lowest, and less than 10% at other concentrations, and the percent error values were less than 6%. The method displayed a high caliber of sensitivity and selectivity for therapeutic monitoring concentrations of bupivacaine in human plasma. Cet article de recherche s’articule autour du processus de quantification de la bupivacaïne dans le plasma humain à l’aide d’une méthode chromatographie liquide à haute performance. L’extraction de la bupivacaïne et de la ropivacaïne comme étalon interne à partir du plasma a été réalisée en utilisant de l’hexane avec de l’alcool isopropylique. Après l’extraction liquide-liquide, nous sommes passés directement au processus de préparation de la phase mobile qui est constituée par un mélange d’acétonitrile et de dihydrogénophosphate de potassium (65/35, v/v). La séparation a été effectuée sur une colonne C18 en phase inversée avec un détecteur UV à 210 nm pour la bupivacaïne et 230 nm pour l’étalon interne. Cette mise au point particulier a montré une excellente linéarité ( r 2 = 0,999) en réponse maximale sur la plage de concentration de 0,1–1,5 μg/mL de chlorhydrate de bupivacaïne dans le plasma humain. Les taux de récupération absolus moyens pour 0,5 et 1,5 μg/mL de chlorhydrate de bupivacaïne dans le plasma au moyen par le biais de mode d’extraction étaient respectivement de 97,43 % et 95,03 %. Les coefficients de variation dans le plasma intra et inter jours étaient inférieurs à 12 % aux valeurs les plus basses et inférieurs à 10 % aux autres concentrations, et les valeurs d’erreur en pourcentage étaient inférieures à 6 %. La méthode a montré une sensibilité et une sélectivité élevées pour le suivi thérapeutique des concentrations de bupivacaïne dans le plasma humain.