Screening and Molecular Identification of Tyrosinase-producing Actinobacteria from Soils of the Maranjab Desert, the Hampoeil Cave, and the Hormoz Island

Abstract

مقدمه: آنزیم‌های اکسیدکننده تیروزین یا تیروزینازها کاربردهای متنوعی در حوزه‌های درمانی، غذایی و محیطی دارند. با توجه به اهمیت اکتینوباکترها به عنوان یکی از مهم‌ترین باکتری‌های نوید بخش مولد ترکیبات زیست فعال و آنزیم های دارای کاربردهای زیست فناورانه، مطالعه‌ی حاضر با هدف غربالگری و شناسایی جدایه‌های مولد آنزیم تیروزیناز از نمونه‌های خاک های کویر مرنجاب، غار هامپوئیل و جزیره هرمز انجام شد.مواد و روش ها: تعداد 10 نمونه خاک از کویر مرنجاب و 10 نمونه خاک از مناطق مختلف جزیره‌ی هرمز جمع آوری و پس از کشت در محیط ISP2 آگار، جدایه‌های اکتینوباکتر جداسازی و خالص‌سازی شدند. این جدایه‌ها و نیز جدایه های تهیه شده در پژوهش پیشین از غار هامپوئیل با کشت بر روی محیط تیروزین آگار و تیروزین براث غربالگری شدند. در ادامه فعالیت تیروزینازی جدایه‌های منتخب به صورت کمی مورد ارزیابی قرار گرفت. در نهایت این جدایه‌ها با تعیین ترادف و آنالیز ژن 16SrRNA شناسایی شدند. نتایج: از میان 89 جدایه اکتینوباکتریایی غربالگری شده، کلنی‌های 17 جدایه در محیط کشت تیروزین آگار هاله‌ی شفاف و رنگیزه‌ی قهوه ای-سیاه داشتند و به عنوان جدایه‌های مولد آنزیم تیروزیناز مورد غربالگری کیفی ثانوی قرار گرفتند. نتایج غربالگری ثانوی تایید کرد که 11 جدایه مولد آنزیم تیروزیناز هستند. همچنین نتایج سنجش کمی نشان داد که سویه‌های UTMC 3165 و UTMC 3233 به ترتیب با میزان فعالیت آنزیمی، به ترتیب، 33 و 35 واحد در میلی لیتر بیشترین فعالیت آنزیمی را دارند. این دو جدایه از نظر ترادف ژن 16S rRNA به ترتیب 67/99 و 88/99 درصد شباهت به سویه‌های Streptomyces tendae و Streptomyces thermocarboxydus داشته اند.نتیجه گیری: نتایج این پژوهش نشان داد که خاک‌های ایران دارای اکتینوباکترهای توانمند در زمینه‌ی تولید آنزیم تیروزیناز هستند. این جدایه ها متعلق به جنس Streptomyces بوده اند که از غار هامپوئیل جدا شده بودند.