Rôle du stress oxydant dans la sénescence des lymphocytes T induite par l’exposition à la fumée de cigarette

Abstract

Introduction La fumee de cigarette, source de stress oxydant, majore la severite de diverses maladies inflammatoires chroniques par des mecanismes peu connus. Le role pathogene des lymphocytes T CD4+ (LTCD4+) producteurs d’IL17 (Th17) dans est etabli dans ces maladies, dont la bronchopneumopathie chronique obstructive (BPCO), maladie respiratoire inflammatoire chronique dont le principal agent etiologique est le tabagisme. Dans la BPCO, les cellules pulmonaires presentent une senescence prematuree, associee a une inflammation plus importante et a la severite de la maladie. Methodes Les LTCD4+ peripheriques Th17, Th1/Th2 = non-Th17 et Treg de sujets sains sont isoles, puis traites avec du condensat de fumee de cigarette (CFC). L’induction de senescence est evaluee en immunofluorescence par l’expression du marqueur de senescence p16. L’effet des especes reactives de l’oxygene (ERO) est evalue apres traitement par l’anti-oxydant, NAC. La production d’ERO est mesuree par cytometrie en flux par la capacite d’oxydation de la sonde H2DCF-DA. La reponse anti-oxydante est evaluee en RQ-PCR par l’expression des enzymes anti-oxydantes. Resultats L’exposition au CFC induit une expression de p16 plus importante dans les Th17 que dans les autres LTCD4+. Le traitement par NAC previent l’expression de p16, indiquant le role potentiel des ERO contenues dans le CFC. Les Th17 produisent plus d’ERO que les autres LTCD4+ apres exposition au CFC, mais aussi en condition basale. Les resultats de RQ-PCR montrent une moindre expression des enzymes anti-oxydantes (Gpx2, TrxR, HO-1) dans les Th17 par rapport aux Treg, et une expression plus importante d’IL4I1, une mono-amineoxydase productrice d’H2O2. Conclusions Nos resultats indiquent que senescence et susceptibilite a l’agression oxydative pourraient etre liees dans les LTCD4+, et que les Th17 pourraient avoir une plus grande susceptibilite a la senescence induite par le CFC en rapport avec un taux d’ERO plus important par rapport aux autres LTCD4+. Nous analyserons ensuite le secretome inflammatoire des Th17 associe a l’augmentation de p16 apres exposition au CFC, puis nous determinerons si les particularites observees au niveau du secretome et/ou de la reponse oxydative des Th17 chez les sujets sains sont majorees chez les patients BPCO.